培养基血清质量和浓度的不同对肠干细胞群分离培养的影响

摘要

目的 通过改变细胞培养基中血清的质量和浓度,探索构建小鼠肠干细胞群更合适的血清及浓度.方法 取孕17d昆明系小白鼠的胚胎鼠肠组织,予肠干细胞的培养,将获得的细胞溶于8组细胞培养液,种于24孔板中.细胞培养液共有8组,采用DMEM培养基和新生牛血清或胎牛血清配制,血清的浓度分别为5％、10％、15％及20％,除此以外还含有胰岛素、谷铵酰胺、表皮生长因子以及双抗(青霉素、链霉素)等成分.最后进行角蛋白抗体及波形蛋白抗体免疫组化染色鉴定细胞来源.结果 24～48 h后,细胞开始贴壁生长.显微镜下可见,除采用10％新生牛血清的组外,其他组细胞均含有大量的间质细胞,上皮细胞所占比例不足10％.而如采用含10％的新生牛血清培养基培养,则贴壁生长的细胞绝大部分为上皮细胞.经传代后,所培养出的肠干细胞群角蛋白18亚型染色阳性.而其他组的细胞,则基本上为间质细胞.结论 构建肠干细胞群应选用10％的新生牛血清.