培养基血清浓度对5-氮胞苷诱导脂肪间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的影响

摘要

目的 观察脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向心肌样细胞诱导分化的适宜培养基血清浓度.方法 采用Ⅰ型胶原酶消化法自成人脂肪组织分离ADMSCs进行培养.对第3代细胞以10 μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)诱导作用24 h,用含10%、5%胎牛血清的完全培养基继续培养,镜下观察细胞形态学变化,采用免疫细胞化学染色鉴定心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI),计算心肌细胞转化率,采用RT-PCR方法 检测NKX2.5、GATA4及cTnI基因表达.结果 5-aza诱导ADMSCs后7 d细胞形态及排列开始发生变化,4周后可见极个别细胞出现细微搏动, 10%、5%胎牛血清培养下心肌样细胞转化率分别为31.5%±4.2%、32.8%±5.0%,P=0.72;RT-PCR产物条带见NKX2.5、GATA4及cTnI基因表达.结论 ADMSCs在5-aza诱导后于低浓度血清培养基中培养效果更好.