不同胎牛血清浓度培养的人脐带间充质干细胞的条件培养基对角膜上皮细胞损伤修复的影响

摘要

目的 探讨不同胎牛血清(FBS)浓度培养下人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)条件培养液(hUCMSCCM)对角膜上皮细胞损伤修复的促进作用.方法 采用贴壁法培养,以含有1％,3％,5％,10％的FBS培养基培养P6代hUCMSCs并收集4种培养条件下的培养基,利用CCK-8方法检测细胞hUCMSCCM对角膜上皮细胞增殖的影响;收集4种hUCMSCCM培养损伤的角膜上皮细胞,检测其对角膜上皮细胞损伤修复的影响;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测4种hUCMSCCM中血小板源性生长因子(PDGF)和白细胞介素-8(IL-8)的含量.结果 ①收集的4种hUCMSCCM均能促进角膜上皮细胞增殖,随着培养时间的延长,其中1％hUCM-SCCM和3％hUCMSCCM2组条件下,角膜上皮细胞的增殖能力显著高于其他实验组和对照组;②4种hUCM-SCCM均促进角膜上皮细胞的迁移,1％hUCMSCCM在24 h促进角膜上皮细胞损伤修复最为显著,随着时间延长,除10％hUCMSCCM组外其余组均表现出显著的促进角膜上皮细胞损伤修复的能力;③4种UCMSCCM中PDGF的分泌具有差异性,随着血清浓度的增大,PDGF的含量逐渐减少;而IL-8的分泌与血清浓度的增加呈现正相关性.结论 不同浓度FBS培养的hUCMSCCM对角膜上皮细胞增殖和损伤修复具有促进作用,其中1％FBS hUCMSCCM在24 h修复和促增殖最为显著;其作用是通过分泌修复因子促进角膜上皮细胞的增殖和迁移,从而保护角膜上皮细胞.干细胞条件培养基将成为角膜上皮损伤的新治疗方法.