碱性蛋白酶Alcalase酶解大米蛋白制备小分子肽的动力学研究

摘要

以大米蛋白为原料,用碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解大米蛋白制备小分子多肽.采用单因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中pH、加酶量、底物浓度和温度酶解初速度的影响,并建立了酶解动力学方程.研究了最优酶解条件下酶解过程中酶解产物的分子量分布状态.结果表明,Alcalase2.4L酶解大米蛋白的最优pH 8.5、温度65℃、酶底比0.096 AU/g(底物),在酶解过程中存在产物抑制,在研究的底物浓度范围内(＜90g/kg)不存在底物抑制.主要动力学参数为:Km为5.76 (g·min)/mmol,Vmax为0.67mmol/(kg·min),k2为0.28 mmol/(AU·min).酶解动力学方程为:1/V0=56.29/[S0][E0]+ 1/0.28[E0].酶解至3h时水解度达到16％,酶解产物的分子量在264～584 u之间的组分达到94％,酶解3h后酶解产物的分子量分布基本保持不变.本研究结果为制备大米蛋白小分子活性肽奠定基础.