反向高效液相色谱测定发酵液中的聚苹果酸

摘要

采用高效液相色谱柱AlltimaTM C18 (4.6 mm× 150 mm,4μm)上定量测定发酵生产的聚苹果酸,流动相为乙腈和0.025 mol/L磷酸二氢钾混合溶液(磷酸调pH 2.5)(V∶V=5∶ 95),流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,柱温25℃,进样量5μL.发酵液经离心除菌体、纯沉除多糖、水解处理后进样,可以将其中的L苹果酸完全分离定量.采用液相方法的回收率为98.70％-100.65％,RSD为0.4-1.11％.采用试剂盒的方法的回收率为96.7～97.23％,RSD为0.57～1.19％.可见,液相的精确度和试剂盒相差不大.但液相的价格相对比试剂盒要便宜很多,说明该法是测定发酵液中聚苹果酸的一种很有效的方法.