基于CHO细胞定点整合技术的新型抗体呈现系统的构建

摘要

目的建立一个以CHO定点整合系统为基础的高通量抗体筛选平台，筛选获得抗VEGF高亲和力突变体抗汁。方法设计并构建了基于CHO细胞定点整合系统的通用minibody展示载体，将3株亲和力已知的抗VEGF抗体（A6，A63，A657）和1个抗VEGF轻链抗体库分别呈现在CHO细胞的表面，通过Western印迹、Bia-core3000、流式细胞分析等对该展示系统进行验证和评价，并通过流式细胞分选技术对抗体库进行了细胞筛选。结果成功实现了抗VEGF抗体在CHO细胞表面的展示，流式细胞分析抗体的亲和力与Biacore测定全抗体亲和力结果一致；通过筛选获得3株抗VEGF高亲和力突变体抗体。结论建立了基于CHO定点整合技术的新型抗体库展示系统，为抗体的亲和力成熟、分子改造等突变库的构建和筛选提供了新的技术支持。