应用一步和套式PCR法检测SARS患者标本中的SARS病毒核酸序列

摘要

目的:建立敏感、特异和快速的针对SARS病毒的RT-PCR方法,为SARS的早期诊断及防治提供依据.方法:采用一步和套式PCR法对SARS患者不同标本中的SARS病毒RNA进行扩增及序列测定.结果与结论:应用外引物和内引物可分别扩增出约380bp和150bp的单一条带,其大小与预期的相一致.应用套式PCR可使检测敏感性从10-6提高到10-15.采用这种方法从SARS患者粪便、痰、鼻咽拭子和血液标本中均可扩增出与预期大小一致的条带,且测序结果显示该扩增片段为SARS病毒的特异序列,表明本研究建立的RT-PCR方法敏感、特异,可用于SARS的快速检测.