大肠癌相关基因ST13转录启动区的增强子研究

摘要

目的 :探讨大肠癌相关基因 ST13上游 5 '近端调控区 (- 5 95～ + 74 )中增强子碱基序列。方法 :设计系列缺失 PCR引物 ,扩增 ST13基因 5 '近端碱基序列片段 ,p GEMT- EASY克隆、测序 ,再亚克隆到 p GL 2系列瞬间报告载体上 ,等量转染 SW6 2 0细胞 ,检测荧光酶活性。结果 :系列扩增碱基序列片段 6 6 9bp、2 6 3bp、16 3bp对p GL2 - Basic中的荧光素酶基因均具有较强的启动表达作用 ,片段 10 1bp、4 7bp则几乎没有启动下游基因表达的作用。而 10 1bp片段与系列报告载体 p GL 2重组的分子 ,在其中含有启动子的报告基因表达载体中具有明显的增强作用 (P<0 .0 1) ,但作用强度小于阳性对照 p GL2 - Control(P<0 .0 5 )。结论 :位于 ST13基因上游 5 '近端调控区的碱基序列 10 1bp片段 (- 5 95～ - 494 ) 。