nm23-H1转染Tca8113细胞后稳定表达细胞株的建立

摘要

目的:建立稳定高表达nm23-H1的细胞株.方法:将nm23-H1真核表达质粒转化大肠杆菌,制备感受态细菌.提取质粒,酶切琼脂糖电泳对质粒进行鉴定.脂质体介导将质粒转染人舌鳞癌细胞株Tca8113,G418持续筛选5周,对获得的细胞株进行免疫组化、Western-blott和流式细胞仪鉴定.结果:酶切琼脂糖电泳证实插入nm23-H1片段长度为986 bp,质粒片段长度为6 550 bp,nm23-H1的cDNA被插入在pCMV-Bam-Neo中的BamH1区域.免疫组化、Western-blott和流式细胞仪鉴定表明nm23-H1高表达.结论:成功建立稳定高表达nm23-H1的细胞株.