抗猪囊虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和特性鉴定

摘要

目的:培养、筛选和克隆鼠源杂交瘤细胞株,生产相应特异的针对猪囊虫的单抗并用于临床.方法:用含有弗氏不完全佐剂和1单位IFN的猪囊虫囊液皮下注射免疫 7周龄小鼠3 次后,无菌取出脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,在含有50%PEG(分子量4000)的HAT培养液中进行融合,在37℃,含7%CO2的培养箱中培养,随后在正常培养液中进行筛选和克隆化 .染色体分析用常规的中期染色体法,单抗类型的滴度测定用ELISA法.结果:用常规的有限稀释法对杂交瘤进行3次筛选和克隆化后获得3株杂交瘤细胞株2H10、5C2和5H6,分别有 97、98和106条染色体,均能稳定地分泌各自特异的单抗.2株单抗为IgG类,另1株为IgM 类,滴度分别为1∶1000、1∶800和1∶1600.结论:用杂交瘤技术 ,我们获得了3株杂交瘤细胞株,均能稳定地分泌高滴度的针对猪囊虫抗原的特异单抗.