氧化苦参碱预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌保护作用及其机制研究

摘要

目的 观察氧化苦参碱预处理对大鼠缺血再灌注心肌的影响,探究其心肌保护作用及可能的机制.方法 建立大鼠心肌缺血再灌注模型,60只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、氧化苦参碱预处理组(OMT组)、氧化苦参碱与PKC阻断剂白屈菜红碱联合组(OC组)、PKC阻断剂白屈菜红碱处理组(CHE组)和经典缺血预适应组(IP组).记录心率(HR)、血压、左心室功能等血流动力学参数.再灌注120min后,留取动脉血及心脏组织,分别检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB),心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、心肌丙二醛(MDA)含量等.HE染色观察心肌组织病理学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况.PepTag@非放射性蛋白激酶检测系统检测蛋白激酶C(PKC)活性.免疫印迹法检测心肌细胞PKC的表达.结果 I/R组心电图有明显的ST段改变.OMT组HR、左心室收缩压(LVSP)、左室压力最大上升/下降速率(+ LVdp/dtmax/-LVdp/dtmin)等均高于I/R组,OMT组与IP组HR、LVSP无显著差异(P＞0.05).再灌注120min后,OMT组LDH、CK-MB和MDA含量显著低于I/R组(P＜0.05),SOD含量显著高于I/R组(P＜0.05).OMT组LDH及CK-MB含量低于CHE组(P＜0.05).I/R组心肌细胞肿胀,肌纤维排列松散紊乱,出现炎细胞浸润及心肌纤维化.和I/R组相比,OMT组心肌纤维化程度改善,OC组和CHE组未见改善.OMT组凋亡指数AI低于I/R组(P＜0.05),与IP组差异无统计学意义(P＞0.05).与L/R组相比,OMT组PKC活性增强,PKCε表达量增加(P＜0.05).结论 氧化苦参碱预处理对大鼠缺血再灌注心肌损伤有保护作用,其机制可能为氧化苦参碱通过激活PKC启动抗氧自由基、抗细胞凋亡等内源性保护机制有关.