人原代脐静脉内皮细胞体外模型的建立及鉴定

摘要

目的 探寻一种简单、有效的人脐静脉内皮细胞体外培养方法,为心脑血管疾病研究提供细胞模型.方法 0.1％ Ⅱ型胶原酶和0.25％胰蛋白酶-0.02％ EDTA(1∶1)灌注分离人脐静脉内皮细胞,细胞置于DMEM培养基中,37℃、5％ CO2培养箱内培养,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,激光共聚焦显微镜鉴定Ⅷ因子相关抗原和透射电镜观察细胞超微结构.结果 细胞分离0h时,混杂较多红细胞,24h后细胞呈球形、小多角形、椭圆形,呈簇状分布,3d后变成梭形单层铺路石状;共聚焦扫描见胞浆中Ⅷ因子相关抗原呈阳性;透射电镜可见胞浆内有Weibel-Palade小体.结论0.1％胶原酶Ⅱ和0.25％胰蛋白酶-0.02％ EDTA 混合消化液灌注是获得人脐静脉内皮细胞的一种可靠方法,细胞纯度高、活性好.