RNAi沉默Cyr61基因对喉癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响

摘要

目的:观察RNA干扰技术沉默Cyr61基因表达对人喉癌Hep-2细胞生物学行为的影响.方法: 针对Cyr61 mRNA的序列设计合成小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pRNAT- Cyr61重组质粒,转染人喉癌Hep-2细胞; RT-PCR和Western blot检测其对Hep-2细胞内源性Cyr61表达的影响;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察Hep-2细胞体外增殖活性变化;Transwell小室法检测Hep-2细胞体外侵袭能力的改变;流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡.结果: pRNAT-Cyr61重组质粒在mRNA及蛋白水平分别显著抑制Cyr61基因表达,抑制率分别最高达到74.62%和78.43%;Hep-2细胞的体外生长抑制率最高达68.22%,侵袭细胞数下降至(44.00±2.35)个;Hep-2细胞凋亡率最高达52.98%.结论: pRNAT- Cyr61可抑制Cyr61在喉癌Hep-2细胞中的表达,并抑制细胞的增殖活性和侵袭能力,促进细胞凋亡.