幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白包涵体的纯化及活性鉴定

摘要

目的:建立一种有效的纯化幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位-尿素酶B亚单位(HspA-UreB)融合蛋白包涵体的方法.方法:基因工程重组大肠杆菌BL21(pET-HU27)诱导表达的HspA-UreB融合蛋白包涵体经洗涤、变性、复性,在AKTA FPLC上运用HiTrap Chelating HP分离纯化,用SDS-PAGE和Bradford法检测目的蛋白的纯度和含量,用Western blotting对纯化后蛋白进行免疫学活性鉴定.结果:纯化后HspA-UreB融合蛋白的纯度＞90%,含量达0.25 g·L-1,并可以被HspA-UreB融合蛋白免疫小鼠血清识别.结论:成功地建立了从包涵体中纯化高纯度HspA-UreB融合蛋白的方法.