幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白纯化及其免疫效果的研究

摘要

本研究对本研究室构建的HspA-UreB融合蛋白原核表达系统BL21(pET-HU27)的诱导表达条件进行进一步探索，对HspA-UreB融合蛋白原核表达系统表达的可溶性蛋白和包涵体进行分离、纯化和鉴定，并应用纯化产物联合佐剂免疫动物，评价该融合蛋白的免疫保护效果，以确定HspA-UreB融合蛋白作为疫苗抗原的应用价值，为开发高效的Hp疫苗奠定基础。结论:　　1、本研究通过降低诱导温度、改变诱导剂浓度、诱导时间和培养基等方法优化了重组工程菌BL21(pET-HU27)诱导表达条件，提高了可溶性融合蛋白HspA-UreB在全菌蛋白中的含量；运用AKTAFPLC蛋白纯化系统，经镍离子亲和层析，成功建立了从重组HpHspA-UreB融合蛋白的可溶性表达产物和包涵体中纯化较高纯度(＞90％)融合蛋白的工艺。　　2、本研究采用第1、21天免疫小鼠的程序，应用动物模型评价了融合蛋白HspA-UreB联合rCTB作为预防Hp感染口服疫苗的免疫保护效果，取得了60％的保护率，并证明了以融合蛋白HspA-UreB为Hp疫苗抗原以实验剂量进行免疫是具有良好的安全性。　　3、本研究观察了免疫接种融合蛋白HspA-UreB后小鼠体内特异性sIgA的变化情况，免疫加强后12天特异性sIgA开始出现，第16天达到最高，为今后选择更加合适的免疫程序，探讨抗Hp免疫机制打下基础。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词

郑重声明

引言

第一部分：幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白的诱导表达和纯化

材料与方法

结果

讨论

第二部分：幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白免疫效果的实验研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 幽门螺杆菌疫苗研究进展

致谢

硕士研究生期间科研成果

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