人早期胚胎源性间充质干细胞的体外分离培养及其生物学特性

摘要

目的:建立人早期胚胎源性间充质干细胞(MSCs)的体外分离培养方法,并对其生物学特性加以鉴定.方法:将胚龄5～6周的胚胎组织经0.25%胰蛋白酶消化7～10 min后获得分离细胞悬液,MSCs培养基纯化贴壁细胞,流式细胞术检测细胞表型特征,MTT法和碘化丙啶(PI)标记测定细胞增殖活性和细胞周期,条件培养液诱导法鉴定其多向分化潜能.结果:采用组织消化法从人早期胚胎组织中分离获得MSCs,表面标志CD29、CD44、CD73、CD105、CD166呈阳性表达,CD34、CD45和HLA-DR为阴性表达;细胞倍增时间为23 h;细胞在成脂诱导条件下可见脂滴形成,成骨诱导2周后细胞碱性磷酸酶染色显示类骨结节区呈棕黑色(活性明显增强),茜素红染色可见钙盐沉积.结论:人早期胚胎源性MSCs与成体MSCs表型一致,具有成脂和成骨分化潜能.