罗非鱼肌肉乙酰胆碱酯酶的制备及冻干稳定性研究

摘要

以罗非鱼(Oreochromis aurea)肌肉组织为材料提取乙酰胆碱酯酶,采用正交试验法研究了不同提取条件(离心转速、提取液质量体积比W/V、匀浆时间)下肌肉粗酶液的酶活力,得到提取酶的最佳条件组合为离心转速6000rmp,提取液质量体积比W/V为1:4,匀浆时间为20s.在酶的冷冻干燥稳定性实验中,添加5％聚乙二醇或5％蔗糖作为稳定剂能有效保护酶活力,冻干时剩余酶活力约为80％.作为保护剂5％聚乙二醇和5％蔗糖两者的差异不显著.酶干粉保存15d时,三种保存温度下(-20℃,0-4℃,20-25℃),添加保护剂与不添加保护剂的酶活力差值约为10％;30d时,差值为10％～15％;60d时,差值为30％～40％.随着保存温度的提高,添加保护剂的稳定效应逐渐被较高温度对酶活力的不利影响抵消.添加5％聚乙二醇作为稳定剂,-20℃,60d时,酶干粉测得剩余酶活力为74％.