植物乳杆菌乳酸脱氢酶的分离纯化工艺研究

摘要

为进一步研究植物乳杆菌乳酸脱氢酶的酶学性质,探讨了乳酸脱氢酶的分离纯化工艺.采用了硫酸铵沉淀、DEAE Sepharose F.F.离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 F.F.疏水层析及Sephadex G-25 Fine凝胶过滤等纯化方法,确定了较为合理的纯化工艺.酶蛋白纯化倍数达到21.4倍,酶活回收率为53.9%,为以后乳酸脱氢酶的进一步纯化提供了一定基础.高效液相色谱和SDS-PAGE电泳初步表明:乳酸脱氢酶相对分子质量为80000,含有2个亚基,且每个亚基相对分子质量大致为39000.