植物乳杆菌亚油酸异构酶基因在大肠杆菌中的表达和功能鉴定

摘要

应用基因重组表达技术将一个推定的植物乳杆菌亚油酸异构酶基因(pli18)克隆到pET-30a载体的T7启动子的下游, 构建pET30-pli原核表达载体.经IPTG诱导和低温培养20h后,在其宿主菌E.coli BL21(DE3)中成功表达了可溶性的PLI18重组蛋白.通过Ni-NTA亲和层析纯化和酶反应产物的气相色谱检测表明,PLI18重组蛋白具有亚油酸异构酶活性,从而证明pli18基因为1个新的亚油酸异构酶基因.为亚油酸异构酶的进一步研究及其在农产品加工中的应用打下了基础.