大肠杆菌Ee株SLT-ⅡeB与FedF基因在大肠杆菌中融合表达及抗血清的中和特性

摘要

根据猪水肿病大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-IIeB和FedF的基因序列,利用PCR技术克隆目的片段,并将SLT-IIeB和FedF基因依序串联于谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统的GST下游,在大肠杆菌中成功获得了大小约为63ku融合蛋白GST-SF,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原免疫新西兰兔制备血清,体外活性试验表明,所制备的抗血清能中和Ee株水肿毒素对Vero细胞的病变效应；黏附抑制试验证实抗血清能抑制E2株对猪小肠刷状缘细胞的黏附.研究表明GST-SF融合蛋白具有SLT-IIeB及FedF的中和表位。