一株产紫杉醇真菌PM-1菌株的原生质体制备条件研究

摘要

在探明小孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)pM-1菌株产生紫杉醇的基础上,本试验系统研究了菌龄、孢壁降解酶、稳渗剂、酶解时间及温度和培养基初始pH值对小孢拟盘多毛孢PM-1菌株原生质体制备和再生的影响,以期建立稳定高效的原生质体制备和再生体系.研究发现,小孢拟盘多毛孢PM-1菌株原生质体制备受多种因素影响,其中主要因素为混合酶系中各种酶的浓度配比及酶解时间,综合各项试验结果,明确PM-1菌株原生质体制备适宜的条件为分生孢子悬浮液接种Fries液体培养基(pH5.5)振荡培养18 h,Lywallzyme(7.5 g/L)、Drislase(7.5 g/L)、Snailase(7.5 g/L)3种酶的混合溶液,在36℃下酶解3h,以0.7 mol/L NaC1作为稳渗剂制备的原生质体产量最高.研究结果为菌株的遗传改良和提高菌株的紫杉醇产生率奠定了基础.