螺内酯诱导神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株凋亡及其机制

摘要

目的:探究螺内酯对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株的增殖抑制和诱导凋亡的作用及机制。方法:SK-N-SH细胞分为不同浓度螺内酯组(螺内酯浓度分别是5、10及20μmol/L)及不加螺内酯的对照组,干预4、8、16、24、48h;用MTT法检测螺内酯对SK-N-SH的增殖抑制率,AnnexinV/PI流式细胞术分析螺内酯作用24h时SK-N-SH细胞早期凋亡率,qRT-PCR检测不同浓度螺内酯处理24h时SK-N-SH细胞Bcl-2、BaxmRNA表达水平,Westernblot方法检测20μmol/L螺内酯处理24h时SK-N-SH细胞内Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:不同浓度螺内酯处理SK-N-SH细胞16h后,对细胞有明显的增殖抑制作用,螺内酯浓度越高、作用时间越长,增殖抑制作用越强(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,螺内酯各浓度组作用24h时SK-N-SH细胞早期凋亡率较对照组明显升高,且呈现浓度依赖性;qRT-PCR结果显示,与对照组相比,螺内酯各浓度组SK-N-SH细胞Bcl-2mRNA表达量明显降低,Bax的mRNA表达量明显升高;Westernblot检测结果显示,与对照组比较,20μmol/L螺内酯处理24h时SK-N-SH细胞内Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加。结论:螺内酯作用一定浓度及一定时间对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞具有诱导凋亡作用,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax表达有关。