化学发光酶免疫法测定动物源性食品中呋喃唑酮代谢物的含量

摘要

目的:建立化学发光酶免疫法(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLIIA)测定动物源食品中呋喃唑酮代谢物的分析方法:.方法:通过使用N-羟基琥珀酰亚胺酯法将衍生的CPAOZ半抗原与卵白蛋白(ovalbumin,OVA)缀合以合成包被抗原,优化CLEIA酶免疫方法的主要条件.对CLEIA酶免疫法的灵敏度、特异性、精密度及准确度进行评价,并就准确度指标同国家标准中的液相色谱串联质谱法进行对比分析.结果:包被原和单克隆抗体稀释倍数分别为4000倍和1600倍,1％脱脂乳封闭,竞争时间30 min,HRP-IgG孵育时间60 min时为最佳条件.CLEIA的线性方程为Y=-0.357X+ 1.459(r2=0.984),IC50为0.486 ng/mL,线性范围为0.070～3.362 ng/mL.回收率在87.9％～92.6％之间,批内和批间变异系数分别为3.6％～7.5％和3.2％～6.3％.结论:该方法简单,快速,可用于实验室或现场动物源性食品的AOZ筛选.