CCl4对建鲤肝细胞DNA的毒性作用及对CYP3A基因表达的影响

摘要

四氯化碳(CCl4)作为一种经典的肝脏毒物,被广泛应用于哺乳动物的肝损伤模型构建及保肝药物筛选.低、中、高浓度的CCl4-橄榄油溶液(6.25％、12.50％和15.00％,0.01 mL/g)腹腔注射建鲤72 h后,采用单细胞凝胶电泳和肝组织病理切片技术,测定血清中肝损伤生化酶来考察CCl4对肝细胞DNA的毒性作用；同时采用实时荧光定量PCR法测定肝组织中CYP3A表达量的变化.结果显示,6.25％ CCl4作用建鲤72 h后肝组织切片检查没有发生明显的改变,对血清中酶学指标无显著影响,CYP3A的mRNA表达量与空白对照组相比也没有显著变化,而彗星实验结果显示该浓度的CCl4作用肝细胞后,尾长、TDNA、尾矩及Olive尾矩等DNA损伤指标与对照组相比,显著增大；随着CCl4作用浓度的增加,肝细胞肿胀、广泛空泡变性,出现核固缩和核溶解等组织学的变化,12.50％和15.00％ CCl4均能显著引起血清中谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)水平升高,15.00％ CCl4能显著促进乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)大量生成；彗星实验中各项损伤指标也随着染毒剂量增加而极显著增大；同时,12.50％和15.00％ CCl4组的CYP3A mRNA表达量显著降低.结果表明,CCl4对建鲤肝细胞DNA具有毒性作用,在实验的浓度范围内,CCl4能抑制CYP3A mRNA表达；随着CCl4作用浓度的增大,血清酶、病理切片和彗星实验结果表现出剂量效应,并有一定的一致性,彗星实验表现出更高的灵敏性.