不同年龄大鼠成纤维细胞增殖能力和端粒长度的变化

摘要

[目的]探讨大鼠成纤维细胞增殖能力和端粒长度随年龄变化的趋势,为研究治疗性克隆中核供体细胞选择提供依据.[方法]采用MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪分析细胞周期变化;Southern印迹法测量细胞端粒末端限制性片段(TRF)长度,同时采用PCR-ELISA法测定细胞端粒酶活性.[结果]①随大鼠年龄增长,成纤维细胞增殖能力不断下降,主要表现为G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞增殖指数下降.传代培养后这种表现更为明显;②一年组和两年组第十代成纤维细胞倍增时间比第一代细胞明显延长;③随着年龄增长和传代次数的增加,威纤维细胞的端粒TRF长度随之缩短,以后者的影响更大;④各年龄组成纤维细胞均不表达端粒酶活性.[结论]①成纤维细胞增殖能力随年龄的增加和培养时间的延长而逐渐下降,其中以后者表现更为明显.②细胞端粒TRF长度随年龄和培养时间延长而缩短,其中体外培养造成的端粒丢失更为显著.