第二十八期鸡胚原始生殖细胞的冷冻保存

摘要

采用Ficoll密度梯度离心,提取第28期(孵化132h)性腺中的PGCs,对其应用不同的冷冻保护剂和不同的平衡方法进行冷冻保存,并于复苏后进行体外培养.复苏后的PGCs用台盼蓝染色检测其存活率,结果发现:从第28期性腺中获取的PGCs在同一种冷冻保护液下,采用不同的平衡方法进行冷冻,对PGCs的存活率有显著影响(P＜0.05);平衡方法相同,在不同冷冻保护液条件下,冷冻保护液Ⅲ的冻存效果最好,与其他保护液之间存在显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)差异.冷冻保护液V和冷冻保护液Ⅵ二者对PGCs的冻存效果次之.冷冻保护液I、冷冻保护液Ⅱ和冷冻保护液Ⅳ三者对PGCs的冻存效果最差.PGCs经体外培养24小时后再进行冷冻保存,复苏后其存活率、体外培养存活时间均极(P＜0.01)显著短于分离后直接冷冻的PGCs.