超高效液相色谱-串联质谱法测定圆椒中甘油磷脂含量

摘要

建立圆椒中磷脂含量测定的超高效液相色谱-串联质谱方法。样品用异丙醇-氯仿-水体系作为提取溶剂,液液萃取法净化,采用HILIC亲水作用色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)体系分离磷脂,电喷雾电离-串联四极杆质谱测定。分别以磷脂酰胆碱(C28:0)、溶血磷脂乙醇胺(C14:0)、溶血磷脂胆碱(C14:0)、磷脂酰甘油(C28:0)、磷脂酰甘油酸(C28:0)、溶血磷脂丝氨酸(C16:0)为对照进行相对定量。实验对提取溶剂和净化方法进行选择,以抽提得到磷脂种类最多、含量最高为前处理方法,并对该方法进行适应性检验。结果表明,6种磷脂在10~1000 ng/mL之间线性良好,检出限为2~300 ng/mL,定量限为10~1000 ng/mL。在125、250 ng/mL和375 ng/mL的添加水平上,回收率在68.06%~84.17%之间,相对标准偏差介于3.40%~9.60%之间。该方法为圆椒磷脂测定提供了可靠的平台,为基于膜脂代谢的圆椒冷害研究提供基础。