北京棒杆菌AS1.299高丝氨酸脱氢酶突变体D206G的酶学性质表征

摘要

高丝氨酸脱氢酶(HSD)是天冬氨酸族氨基酸合成途径的关键酶,在苏氨酸和蛋氨酸生物合成中起到重要作用.将来自于北京棒杆菌AS 1.299的HSD在E.coli BL21(DE3)中成功构建并进行高效异源表达.通过分子对接与同源序列比对发现,206位点参与底物结合,并且在家族中高度保守,因此对突变体D206G进行研究.结果表明:突变体最适pH7.5,最适反应温度37℃,半衰期为4h,并对金属离子和有机溶剂显示出良好的抗性.同野生型相比,突变体Km值减小,可能是由于侧链官能团减小,空间位阻降低,有利于底物结合.