荧光光谱法研究杆菌肽与溶菌酶的相互作用

摘要

利用荧光光谱法研究了杆菌肽与溶菌酶的相互作用.结果表明:杆菌肽能使溶菌酶的内源荧光发生猝灭.在不同温度下研究杆菌肽对溶菌酶的荧光猝灭作用,证明荧光猝灭机理属于二者形成复合物所引起的静态猝灭.利用Stern-Volmer方程处理实验数据,发现杆菌肽与溶菌酶具有1个结合位点,并计算得到了不同温度下杆菌肽与溶菌酶的结合常数(KA):3.60×105 (298 K)、1.90×105 (308 K)、4.51×104 L/mol (318 K).通过计算热力学参数,可知杆菌肽与溶菌酶的相互作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程,且二者之间的主要作用力类型是静电作用.三维荧光光谱实验显示,杆菌肽的加入引起溶菌酶构象的变化,表现为蛋白质内部色氨酸残基所处微环境的疏水性降低.