多重LAMP—熔解曲线法检测食品中两种食源性致病菌

摘要

针对沙门氏菌的侵袭蛋白基因(invA)和金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)设计LAMP引物,优化反应条件,并分别对反应产物进行熔解曲线分析,判断扩增结果,从而建立食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌多重LAMP-熔解曲线检测方法.对9株目标菌和23株非目标菌的检测未出现假阳性和假阴性结果,并可通过熔解曲线的熔解温度分析确定所含目标菌;对产物的测序分析表明所得序列与目的基因序列吻合;对目标菌的检测灵敏度均可达到10 fg/μL;对232份样品的检测结果显示,其中2份生猪肉中检出金黄色葡萄球菌.该方法具有良好的检测特异性,并可为食源性致病菌的快速检测提供一种重要技术手段.