液相色谱串联质谱检测牙鲆鱼中的小清蛋白过敏原

摘要

以合成肽段ALTDAETK为定量特征肽段,SDFIEEDELK及LFLQNFAFSASAR为定性肽段,建立牙鲆中小清蛋白高效液相色谱-串联质谱的检测方法.同时对蛋白提取液、碘代乙酰胺浓度、酶/蛋白质比例、酶解时间在内的前处理条件和肽段质谱参数条件进行了优化.结果显示,ALTDAETK肽段在0.005 ～ 10 mg/L线性关系良好(R2＞ 0.999),小清蛋白定量限2.74 mg/kg;以大菱鲆为空白基质,重组小清蛋白的平均回收率为95％～102％,相对标准偏差(RSD)小于7％,重复性好.该文首次实现了用HPLC-MS/MS方法精确定量检测牙鲆中主要过敏原PV.