两株保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶条件的优化及酶活力测定

摘要

目的优化2株保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶的培养条件,测定其在最适于产酶条件下的酶活力,并初步观察酶活力稳定性。方法测定2株保加利亚乳杆菌———来源于酸奶的wch9901和标准菌株1.1480在不同培养时间、培养基碳源、摇床转速、气体环境下产生的β-半乳糖苷酶的活力,优化产酶条件。测定2株菌在其最适产酶条件下的酶活力。将制得的1.1480粗酶液分别置冰浴和20℃水浴,每隔1 h测定一次粗酶液中β-半乳糖苷酶活力,观察酶活力稳定性。结果2株保加利亚乳杆菌的最适产酶条件分别为:1.1480于30℃有氧静止培养36 h;wch9901于37℃厌氧静止培养18 h,培养基含乳糖。在最适产酶条件下,1.1 4 8 0的酶活力为0.3 2 1NLU/m l粗酶液,比酶活为2.469 NLU/mg蛋白;wch9901的酶活力为0.401 NLU/m l粗酶液,比酶活为6.1 6 9NLU/mg蛋白。1.1480粗酶液于冰浴可稳定保存6 h,于20℃水浴可稳定保存5 h。结论wch9901与1.1480的最适产酶条件有所差异,前者产酶迅速,产酶量多。