原花青素对蛋白质硝基化的抑制作用及机理初探

摘要

目的研究原花青素对蛋白质硝基化的抑制作用,初步探索其抑制机理。方法以BSA为硝化底物、ONOO-为硝化试剂,根据428 nm处吸光度的变化来反映硝基化蛋白含量的变化,进而研究原花青素对蛋白质硝基化的抑制作用。结果通过对蛋白质硝基化反应各种影响因素的探讨,发现在37℃,pH 7.2,反应时间90 min以及BSA与ONOO-终浓度比为1∶6时,硝基化反应进行最为完全。分别在硝基化反应前、反应中以及反应后,向反应体系中引入不同浓度的原花青素的无水乙醇溶液,最后发现在硝化反应发生前加入抑制剂,抑制硝化反应的效果最为明显;当抑制剂终浓度为8.0×10-5mol/L时,抑制率可达66.89%。与褪黑素的比较实验显示,同条件下,二者对蛋白质硝化反应的抑制活性大体相当。抑制机理初步显示原花青素抑制蛋白质硝化反应的机理可能是部分清除ONOO-分解后的.OH或直接与ONOO-反应。结论原花青素抑制蛋白质硝基化反应可能是其对抗心脑血管疾病的分子机制之一,为进一步开发原花青素成为新的临床药物和保健品提供理论支持。