稳定同位素18O标记蛋白质组双重定量新策略及其在YHB1基因敲除的酵母亚硝基化差异蛋白质组研究中的应用

摘要

规模化蛋白质组研究中的准确定量问题是目前蛋白质组研究中的难点和热点。本研究提出了一种基于稳定同位素18O标记的蛋白质组双重定量新策略。本方法是建立在N端肽段和C端肽段普遍标记的基础之上，通过18O化学标记与酶切标记结合的方法，可以实现对同一样本的两种18O标记的定量策略。rn 本研究采用六个蛋白质混合物对该方法进行了全面的方法学考查，结果证明双重定量策略可以显著提高蛋白质组定量的准确性和可靠性。该方法在酵母亚硝基化差异蛋白质组分析研究正在进行，通过该方法来研究酵母细胞中NO刺激作用下和亚硝基化相关的蛋白质的表达量的上调和下调，以期发现NO发挥其广泛的信号转导作用的氧化还原修饰参与重要的细胞信号传导的机制。