^18O稳定同位素标记定量蛋白质组研究技术的建立与优化

摘要

建立了^18O稳定同位素标记方法，用于复杂体系蛋白质相对定量分析。对影响蛋白质标记稳定性的实验条件进行了比较和优化。结果表明，采用酶切后标记的方法，酶切肽段在胰酶催化下，在pH5．0的kHPO4／KH2PO4缓冲体系中，37℃^18O标记反应16h，绝大部分肽段即可达到100％的标记效率。对多个^16O／^18O成对肽段蜂强度的动态范围及定量准确度进行了考察。