大肠杆菌T蛋白的聚合状态分析

摘要

目的解析大肠杆菌T蛋白的四级结构.方法利用分段克隆法克隆表达了T蛋白及其两个独立结构域分支酸变位酶(CM,T/1-94)和预苯酸脱氢酶(PDH,T/93～373),再利用SDS-PAGE测得变性条件下T蛋白、CM和PDH的Mr分别为42×103,11×103和32×103,HPLC测得天然条件下CM和PDH的Mr分别为25×103和63×103,再用化学交联法分析聚合状态.结果T蛋白、独立结构域CM和PDH均为二聚体.结论说明大肠杆菌T蛋白二聚体是通过CM与CM、PDH与PDH相连的.