抗汉坦病毒单链抗体基因向拟南芥遗传转化的初步研究

摘要

目的 构建抗汉坦病毒mAb 1A8 scFv的转基因拟南芥植株.方法 从含有1A8 scFv基因的重组质粒中酶切获得携带Nos终止子的抗体基因片段,将其与CaMV 35S启动子相连克隆入载体pCAMBIA2301,构建1A8 scFv基因的植物表达载体1A8scFv-pCAMBIA2301.通过农杆菌介导的花粉管法将其转入拟南芥,PCR及Dot blot检测是否获得转基因植株,ELISA和固相酶联斑点实验检测表达产物的生物学活性.结果 酶切鉴定结果证明1A8 scFv基因被成功克隆入植物表达载体pCAMBIA2301,构建获得1A8scFv-pCAMBIA2301重组质粒.PCR及Dot blot检测证明获得抗汉坦病毒mAb 1A8scFv的转基因拟南芥植株.ELISA和固相酶联斑点实验结果证明在转基因拟南芥中成功表达了具有生物学活性的抗汉坦病毒mAb 1A8 scFv片段.结论 成功地将外源基因转入拟南芥中并表达.为进一步研究利用植物表达医用抗体奠定了基础.