双靶向纳米超声造影剂在人类表皮生长因子受体2阳性乳腺癌成像中的应用研究

摘要

目的 制备肿瘤识别与人类表皮生长因子受体2 (HER2)识别的双靶向纳米级超声造影剂,体外实验比较单靶性(肿瘤靶向/H ER2靶向)与双靶向(肿瘤+HER2)纳米微泡(nanobubbles,NBs)对HER2阳性乳腺癌细胞的靶向结合能力.方法 改良型薄膜水化法制备纳米级超声造影剂NBs,直接吸附法或“亲和素-生物素法”将近红外荧光染料(IR783)和生物素化的抗HER2分子(Affibody)与NBs结合,制备单靶向纳米超声造影剂(NBs-Affibody,NBs-IR783)和双靶向纳米超声造影剂(IR783-NBs-Affibody),测量其粒径分布、稳定性和生物安全性等理化性质,通过流式细胞技术与免疫荧光成像技术比较以上造影剂对HER2阳性乳腺癌细胞的体外靶向识别能力.结果 NBs-Affibody、NBs-IR783、IR783-NBs-Affibody粒径分别为(538.4±95.8) nm、(551.8±114.8) nm、(482.7±54.3) nm.体外靶向结合实验显示NBs-Affibody、NBs-IR783、IR783-NBs-Affibody对HER2阳性乳腺癌细胞的靶向结合率分别为26.6％、97.6％、84.5％;HER2阴性乳腺癌细胞的靶向结合率分别为5.4％、99.9％、99.3％.双标流式细胞检测显示IR783-NBs-Affibody对HER2阳性乳腺癌细胞的IR783介导的肿瘤靶向结合率为79.5％,Affibody介导的HER2靶向结合率为19.4％;而NBs-IR783对HER2阳性乳腺癌细胞仅表现出IR783介导的肿瘤靶向结合,HER2靶向结合率仅为2.3％.结论 所制备的IR783-NBs-Affibody兼具肿瘤细胞及HER2分子的双靶向识别能力,可以更好地实现肿瘤异质性的靶向结合要求,优于单一靶向造影剂NBs-Affibody与NBs-IR783.