中国水仙NtMYB1基因的克隆及表达分析

摘要

为研究调控花青素合成机制,利用RT-PCR和RACE技术从中国水仙‘金盏银台’(Narcissus tazetta var.chinensis‘Jinzhan Yintai’.)的花瓣和副冠中克隆得到一个MYB基因的cDNA序列,命名为NtMYB1,在GeneBank上登录号为KC763973.序列分析表明,NtMYB1基因全长842 bp,其中开放阅读框长681 bp,编码226个氨基酸,推测的蛋白分子量为25.2 ku,理论等电点为7.94.NtMYB1具有明显的R2R3-MYB结构域,且在R3结构域的下游含有一个相对保守的PDLNLDLSIG氨基酸基序.同源性分析表明,其编码的氨基酸序列与陆地棉、甜樱桃的MYB蛋白相似性分别达到65％和63％.利用实时荧光定量PCR技术检测NtMYB1基因在中国水仙花不同发育时期和部位的表达水平,分析结果表明,NMYB1基因在中国水仙成花不同时期均有表达,但表达量具有明显差异,其中NtMY B1基因在花蕾期的相对表达量约为花苞期的40倍,且其表达量在花瓣要高于副冠.推测NtMYB1可能参与调控花青素合成基因的转录沉默.