白细胞介素17和牙周膜成纤维细胞在体外诱导破骨样细胞生成中的作用

摘要

背景:研究表明,牙根吸收是正畸治疗过程中常见的并发症,而白细胞介素17可能通过牙周膜参与介导破骨细胞的分化和成熟从而引发牙根吸收。目的:探讨白细胞介素17和人牙周膜成纤维细胞在正畸炎性相关牙根吸收中的作用及其作用机制。方法:取4-6代人牙周膜成纤维细胞分别加入含白细胞介素17质量浓度为0或20μg/L的DMEM培养基预处理42 h,取细胞上清液加入50μg/L核因子κB受体活化因子配体(RANKL)分别作用于外周血单核细胞3,5,7,10 d,建立人牙周膜成纤维细胞和外周血单核细胞间接共培养系统。实验分为6组:①对照组;②外周血单核细胞+RANKL组;③外周血单核细胞+人牙周膜成纤维细胞组;④外周血单核细胞+人牙周膜成纤维细胞+白细胞介素17组;⑤外周血单核细胞+人牙周膜成纤维细胞+RANKL组;⑥外周血单核细胞+人牙周膜成纤维细胞+RANKL+白细胞介素17组。采用RT-qPCR法检测外周血单核细胞诱导生成破骨样细胞组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶9、碳酸酐酶ⅡmRNA的表达量,鬼笔环肽染色观察和计数破骨样细胞的细胞骨架中纤维肌动蛋白环的形态和数目。结果与结论:①RT-qPCR分析证实,与对照组相比,白细胞介素17、人牙周膜成纤维细胞和RANKL诱导的基质金属蛋白酶9、组织蛋白酶K和碳酸酐酶Ⅱ表达水平显著提高;②鬼笔环肽染色结果显示,与对照组相比,加白细胞介素17组或(和)加RANKL组肌动蛋白环阳性细胞数目显著增加(P<0.01);③结果提示,白细胞介素17可有效诱导破骨细胞前体分化为具有骨吸收能力的破骨样细胞,其具体机制是通过调节人牙周膜成纤维细胞,上调RANKL下调骨保护素来介导的。