微囊化软骨细胞诱导骨髓间充质干细胞的体外定向分化

摘要

背景：以往诱导骨髓间充质干细胞定向分化的直接接触共培养法、Transwell膜非接触共培养诱导法存在干细胞纯度低、增殖缓慢等不足。目的：对比分析微囊化共培养体系与传统Transvvell共培养体系对骨髓间充质干细胞的诱导效果。方法：实验组取第3代兔骨髓间充质干细胞与微囊化的第2代兔关节软骨细胞，按1：1的比例在Transwell小室进行共培养，同时设置第3代兔骨髓间充质干细胞与第2代兔关节软骨细胞共培养于Transwell小室的传统共培养组，以及纯干细胞培养组。MTT法对比3组干细胞的增殖率，甲苯胺蓝染色、番红花O染色观察软骨基质的合成，阿利新蓝染色法和EIisa法定量测量糖胺聚糖与II型胶原蛋白的合成。结果与结论：传统共培养组细胞增殖率低于实验组与纯干细胞培养组（P〈0．05）。实验组细胞糖胺聚糖和II型胶原蛋白水平高于传统共培养组、纯干细胞培养组（P〈0．05），甲苯胺蓝染色、番红花O染色强度强于传统共培养组、纯干细胞培养组。表明微囊化的软骨细胞能够成功诱导骨髓间充质干细胞向成软骨方向定向分化，且诱导效果优于传统的Transwell膜分离共培养法。