聚乙烯亚胺递送miR-218及miR-26a对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

摘要

背景：骨髓间充质干细胞因其多向分化潜能广泛应用于组织工程领域，miRNA对于促进骨髓间充质干细胞成骨分化具有重要作用。目的：探究miR-218和miR-26a对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响，为诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的相关研究及临床应用提供前期依据和选材参考。方法：提取Wistar大鼠双下肢股骨骨髓，分离培养骨髓间充质干细胞传至第3代备用。miR-218、miR-26a和聚乙烯亚胺(PEI)以特定比例混合孵育形成miRNA/PEI复合物，设立阴性对照组。结果与结论：①大鼠骨髓间充质干细胞生长状态良好；②MTT法筛选miRNAmimics转染适宜浓度为50nmol/L；③qRT-PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的mRNA表达水平增高(P<0.05)；④与空白对照组和阴性对照组相比，碱性磷酸酶染色后胞质均产生了较为明显的着色；⑤茜素红染色出现较多矿化结节。结果显示，以PEI为载体构建的miR-218/PEI复合物、miR-26a/PEI复合物及miR-218+miR-26a/PEI共转染复合物对骨髓间充质干细胞的成骨分化具有一定的促进作用，相同条件下miR-26a成骨能力稍优于miR-218。