年龄相关听力损失DBA/2J小鼠耳蜗毛细胞马达蛋白-prestin表达下调与耳聋的关系

摘要

目的 老年性聋亦称年龄相关性听力损失,主要是听觉器官退行性改变所致.许多研究已证明prestin与内耳的声强感觉和频率分辨密切相关,我们推测老年性聋与耳蜗毛细胞prestin的表达具有一定的关系,本研究探讨prestin在耳蜗毛细胞表达的改变在老年性聋发病机制的作用,期望为老年性聋的防治提供依据.方法 采用快速老化DBA/2J小鼠,对4,8,16和32周龄(W)的48只小鼠进行听觉脑干诱发电位(ABR)测定.耳蜗快速取材固定,全耳蜗铺片行毛细胞记数,免疫组化荧光标记prestin在耳蜗毛细胞的表达,激光共聚焦显微镜进行观察.Western biotting进行prestin蛋白定量分析.结果 耳蜗毛细胞记数结果可见4周龄DBA/2J小鼠的耳蜗基底回有56.35％外毛细胞(outer hair cells,OHCs)消失,中回仅有个别消失,顶回有11.07％的OHCs消失;到8W时,DBA/2J小鼠的耳蜗基底回有97.85％OHCs消失,中回12.7％OHCs消失,顶回近20％的OHCs消失;16周龄时基底回OHCs完全消失,中回有80％的消失,顶回有30％的消失;DBA/2J老化小鼠到32W时,基底回OHCs已全部消失,中回也基本消失殆尽达99.5％,顶回的OHCs有80％左右消失.同时,在4W时OHCs prestin的表达从基底回到顶回均有较强的表达;到8W时耳蜗OHCs prestin的表达整体下降,与4W时相比表达下降十分显著(P≤0.01);到16W时,耳蜗OHCs prestin的表达下降更明显.与其相对应的是ABR反应阈值随年龄增长显著升高.Prestin表达与细胞核显示同时存在,OHCs消失同时prestin表达亦消失.结论 本实验结果证明,年龄相关听力损失DBA/2J小鼠的耳蜗OHCs prestin表达随听力损失而正向表达下降,毛细胞消失部位有prestin表达的消失.说明prestin表达下降是导致老年性聋的重要因素之一,其结果可能是导致老年性聋发生的分子机制之一.