淫羊藿甙对成骨细胞Smad4 mRNA作用的实验研究

摘要

目的检测淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中Smad4 mRNA的影响.方法用0、10、20、40ng/ml的淫羊藿甙刺激MC3T3-E1细胞.用倒置相差显微镜观察细胞生长情况.通过四甲基噻唑蓝(MTT)法测绘细胞生长曲线和计算细胞群体倍增时间;描述刺激MC3T3-E1细胞的增殖能力.用速率分光光度法测定ALP的含量,免疫组织化学法观察Ⅰ型胶原的产生,用以判断细胞的分化情况.用RT-PCR测定Smad4 mRNA的数量.结果10、20 ng/ml浓度淫羊藿甙可使MC3T3-E1细胞的生长曲线明显上移(P＜0.01);0、10、20和40 ng/ml组群体倍增时间分别为(39.37±2.35)h、(26.76±1.78)h、(29.30±2.12)h和(36.35±2.34)h,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.01);0、10 ng/ml可使MC3T3-E1细胞产生ALP和Ⅰ型胶原量增加,刺激ALP作用呈现时间和剂量的依赖性(P＜0.01);RT-PCR显示:10、20 ng/ml浓度淫羊藿甙可以刺激MC3T3-E1细胞Smad4 mRNA的数量增加.上述作用以10 ng/ml浓度最强(P＜0.01).结论淫羊藿甙刺激成骨细胞MC3T3-E1增殖与分化,可能是通过提高MC3T3-E1细胞Smad4 mRNA的量而产生作用.