淫羊藿甙

摘要： 目的:以雷公藤甲素致大鼠卵巢毒性模型为载体,探索补肾活血法对其大鼠卵巢毒性的干预效果。方法:将有正常动情周期的SPF级SD雌性大鼠随机分为4组:正常组、雷公藤甲素模型组(雷公藤甲素50μg·kg^(-1)/d)、中药低剂量治疗组(雷公藤甲素50μg·kg^(-1)/d+淫羊藿苷30 mg·kg^(-1)/d+三七总皂苷30 mg·kg^(-1)/d)、中药高剂量治疗组(雷公藤甲素50μg·kg^(-1)/d+淫羊藿苷60 mg·kg^(-1)/d+三七总皂苷60 mg·kg^(-1)/d),每组6只,共24只,连续给药6个月。巴氏染色阴道脱落细胞涂片了解动情周期,称重计算卵巢子宫指数,留取卵巢行常规病理染色并计数各级卵泡。结果:正常组大鼠动情周期为4~5 d,模型组均出现动情周期紊乱,中药低剂量治疗组和中药高剂量治疗组均有半数以上大鼠动情周期正常。卵巢指数方面,模型组的卵巢指数低于正常组,差异有统计学意义(P0.05)。子宫指数方面,四组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组原始卵泡、黄体数量低于正常组,闭锁卵泡高于正常组,但差异无统计学意义(P>0.05);模型组生长卵泡低于正常组,差异有统计学意义(P0.05);中药低剂量治疗组生长卵泡高于模型组,闭锁卵泡低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);中药低和高剂量治疗组闭锁卵泡低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血法可有效降低雷公藤甲素对大鼠的卵巢毒性。

摘要： 目的:观察淫羊藿甙干预的脂肪间充质干细胞(AMSCs)治疗兔骨性关节炎的效果,并分析其可能的作用机制.方法:取30只新西兰大白兔建立右后肢骨性关节炎模型,造模成功后随机分为3组,每组10只.对照组右后肢膝关节腔内注射同种异体AMSCs进行移植治疗,实验组注射淫羊藿甙溶液干预的同种异体AMSCs进行移植治疗,空白组注射等量的生理盐水.ELISA法检测3组膝关节液内NO、IL-1与TNF-α等炎症因子水平;观察3组关节软骨组织病理改变;TUNEL染色观察关节软骨内软骨细胞凋亡;Western blot检测3组软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达.结果:空白组NO、IL-1与TNF-α浓度升高,关节软骨退变、降解,软骨细胞大量凋亡,软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达增加;与空白组相比,对照组NO、IL-1与TNF-α浓度降低,关节软骨退变、降解减轻,软骨细胞凋亡减少,软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达减少;与对照组相比,实验组NO、IL-1与TNF-α浓度降低,关节软骨退变、降解减轻,软骨细胞凋亡减少,软骨组织内TLR4、MyD88、TRAF6与NF-κB p65蛋白表达减少.结论:淫羊藿甙可降低关节腔内NO、IL-1与TNF-α等炎症因子水平,改善骨性关节炎的微环境,抑制关节软骨细胞凋亡,从而达到保护关节软骨的作用,该作用可能与调节TLR4/NF-κB信号通路有关.

摘要： 目的 研究淫羊藿素(Icaritin)对儿童复发急性淋巴细胞白血病697细胞的抗白血病效应,并探讨其可能的作用机制.方法 体外培养697细胞,分为对照组和淫羊藿素组(5、10、20 μmol/L).采用CCK8法检测淫羊藿素对697细胞的增殖抑制作用,采用Hochest33258染色和流式细胞检测法检测淫羊藿素对697细胞的凋亡诱导作用;应用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cyt-C和Caspase3蛋白的表达.结果 淫羊藿素在5～20 μmol/L浓度范围内作用24～72 h对697细胞有增殖抑制作用,这种作用呈剂量和时间依赖关系(r=0.76,r =0.89);淫羊藿素在5～20 μmol/L浓度范围内作用48 h对697细胞有凋亡诱导作用(P＜0.05);10、20 μmol/L淫羊藿素作用697细胞48 h后,697细胞Bcl-2蛋白的表达显著减少(P＜0.05),而Bax,Cyt-C和Caspase3裂解片段等蛋白表达显著增高(P＜0.05).结论 淫羊藿素可通过抑制697细胞增殖及诱导其凋亡而发挥抗白血病效应,其机制可能通过上调促凋亡蛋白Bax、Cyt-C和下调抗凋亡Bcl-2而诱导697细胞凋亡.

摘要： 目的:探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)干预大鼠椎间盘源性腰痛的效果及可能的作用机制。方法:将45只8周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为5组,假手术组、生理盐水组、ICA 50 mg·kg^-1组、ICA 100 mg·kg^-1组各10只,塞来昔布组5只。生理盐水组、ICA 50 mg·kg^-1组、ICA 100 mg·kg^-1及塞来昔布组大鼠通过L_(4~5)和L_(5~6)椎间盘穿刺建立大鼠腰痛模型;假手术组仅显露椎间盘,不进行穿刺。自造模后第7天开始进行药物干预,至造模后第21天结束。ICA 50 mg·kg^-1组和ICA 100 mg·kg^-1组以ICA溶液进行灌胃(ICA溶于去离子水中),每天剂量分别为50 mg·kg^-1和100 mg·kg^-1;塞来昔布组以塞来昔布胶囊进行灌胃(塞来昔布胶囊粉剂溶于去离子水中),每天100 mg·kg^-1;生理盐水组以生理盐水灌胃,每天100 mg·kg^-1;假手术组常规饲养,不进行干预。从各组随机选取5只大鼠,分别于造模前、造模后第7天、第14天、第21天、第28天、第35天进行足底机械性疼痛阈值检测。造模后第35天,足底疼痛阈值测定结束后处死假手术组、生理盐水组、ICA 50 mg·kg^-1组和ICA 100 mg·kg^-1组的5只大鼠,以qRT-PCR法测定椎间盘组织中P物质(substance P,SP)mRNA和降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)mRNA的含量。造模后第21天时,处死假手术组、生理盐水组、ICA 50 mg·kg^-1组和ICA 100 mg·kg^-1组其余的5只大鼠,以ELISA法测定大鼠椎间盘组织中细胞因子诱导的中性粒细胞趋化剂-1(cytokine-induced neutrophil chemoattractant-1,CINC-1)含量。结果:①足底机械性疼痛阈值。时间因素和分组因素存在交互效应(F=17.971,P=0.001)。5组大鼠的足底机械性疼痛阈值总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=146.660,P=0.000)。造模前后不同时点间足底机械性疼痛阈值的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=118.057,P=0.000)。假手术组足底机械性疼痛阈值随时间未见明显变化,一直处于较高水平[(14.60±0.89)g,(14.79±0.47)g,(15.00±0.00)g,(15.00±0.00)g,(15.00±0.00)g,(15.00±0.00)g,F=0.836,P=0.537]。生理盐水组足底机械性疼痛阈值造模后明显降低,后期一直维持在较低水平[(14.67±0.74)g,(3.44±2.22)g,(3.19±1.37)g,(2.84±0.96)g,(3.92±1.36)g,(3.02±0.98)g,F=58.882,P=0.000]。ICA 50 mg·kg^-1组、ICA 100 mg·kg^-1组和塞来昔布组造模前后的足底机械性疼痛阈值变化趋势基本一致,造模后均先降低,药物干预开始后逐渐回升,药物干预结束后又逐渐降低[(15.00±0.00)g,(2.78±0.81)g,(4.64±1.67)g,(5.59±1.25)g,(8.52±1.63)g,(6.11±1.49)g,F=56.088,P=0.000;(14.66±0.76)g,(2.53±1.37)g,(10.65±2.69)g,(9.67±2.41)g,(10.67±2.04)g,(8.59±2.95)g,F=16.684,P=0.000;(15.00±0.00)g,(2.28±1.03)g,(12.09±1.28)g,(12.37±1.34)g,(6.71±2.89)g,(5.18±1.88)g,F=44.668,P=0.000]。造模后第7天时,ICA 50 mg·kg^-1组、ICA 100 mg·kg^-1组和塞来昔布组的足底机械性疼痛阈值两两比较,组间差异均无统计学意义。造模后第14天时,ICA 100 mg·kg^-1组和塞来昔布组的足底机械性疼痛阈值均高于ICA 50 mg·kg^-1组(P=0.001;P=0.000);ICA 100 mg·kg^-1组和塞来昔布组的足底机械性疼痛阈值比较,差异无统计学意义。造模后第21天时,ICA 100 mg·kg^-1组和塞来昔布组的足底机械性疼痛阈值均高于ICA 50 mg·kg^-1组(P=0.009;P=0.000);ICA 100 mg·kg^-1组和塞来昔布组的足底机械性疼痛阈值比较,差异无统计学意义。造模后第28天时,ICA 100 mg·kg^-1组的足底机械性疼痛阈值高于塞来昔布组(P=0.049);ICA 50 mg·kg^-1组与ICA 100 mg·kg^-1组、塞来昔布组比较,组间差异均无统计学意义。造模后第35天时,ICA 50 mg·kg^-1组、ICA 100 mg·kg^-1组和塞来昔布组的足底机械性疼痛阈值两两比较,组间差异均无统计学意义。②椎间盘组织CINC-1含量。造模后第21天,假手术组、生理盐水组、ICA 50 mg·kg^-1组及ICA 100 mg·kg^-1组大鼠椎间盘组织中CINC-1含量比较,差异有统计学意义[(534.2±142.6)pg·mL^(-1),(28 376.0±976.7)pg·mL^(-1),(21 866.0±1 536.0)pg·mL^(-1),(9 956.0±1 010.0)pg·mL^(-1),F=423.000,P=0.000]。生理盐水组的CINC-1含量高于假手术组、ICA 50 mg·kg^-1组和ICA 100 mg·kg^-1组(P=0.000;P=0.003;P=0.000);ICA 50 mg·kg^-1组的CINC-1含量高于ICA 100 mg·kg^-1组(P=0.000)。③椎间盘组织SP mRNA和CGRP mRNA含量。造模后第35天,假手术组、生理盐水组、ICA 50 mg·kg^-1组及ICA 100 mg·kg^-1组大鼠椎间盘组织中SP mRNA和CGRP mRNA含量比较,组间差异均有统计学意义(1.04±0.49,183.50±118.60,55.50±10.26,19.53±8.05,F=9.499,P=0.000;0.74±0.21,6.29±2.06,1.55±0.69,1.19±0.37,F=27.180,P=0.000)。生理盐水组的SP mRNA含量高于假手术组、ICA 50 mg·kg^-1组和ICA 100 mg·kg^-1组(P=0.008;P=0.042;P=0.015);ICA 50 mg·kg^-1组的SP m RNA含量高于ICA 100 mg·kg^-1组(P=0.000)。生理盐水组的CGRP m RNA含量高于假手术组、ICA 50 mg·kg^-1组和ICA 100 mg·kg^-1组(P=0. 000;P=0. 001;P=0. 000);ICA 50mg·kg^-1组和ICA 100 mg·kg^-1组的CGRP m RNA含量比较,差异无统计学意义。结论:ICA可有效缓解大鼠椎间盘源性腰痛,其镇痛效果与剂量有关,与同剂量的塞来昔布相比其镇痛效果持续时间更长,降低大鼠椎间盘组织中CINC-1的水平可能是其镇痛的作用机制之一。

摘要： 目的探讨淫羊藿苷是否具有抑制血管紧张素Ⅱ诱导的肾脏纤维化作用。方法选取雌性成年的Wistar大鼠并随机分为6组,建立去势后血管紧张素Ⅱ诱导大鼠肾纤维化模型。即假手术(Sham)组、假手术+血管紧张素Ⅱ(Sham+AngⅡ)组、假手术+血管紧张素Ⅱ+淫羊藿苷(Sham+AngⅡ+I)组、手术去势(OVX)组、手术去势+血管紧张素Ⅱ(OVX+AngⅡ)组、手术去势+血管紧张素Ⅱ+淫羊藿苷(OVX+AngⅡ+I)组,每组6只。4周后处理模型大鼠,检测各组大鼠的肾功能、雌激素水平表达变化和肾脏纤维化指标变化情况。取处于对数生长期的大鼠肾脏正常成纤维细胞株(NRK-49F),分为二甲基亚砜(DMSO)处理对照组、AngⅡ组和AngⅡ+I组3组,提取细胞总RNA,检测各组细胞纤维化相关基因表达情况。结果与Sham组相比,OVX组血清肌酐、尿素氮水平和尿微量白蛋白/肌酐(MA/Cr)值均轻度升高,但差异无统计学意义(P值均>0.05)。Sham+AngⅡ组和OVX+AngⅡ组血清肌酐、尿素氮和尿MA/Cr值分别较Sham组和OVX组显著升高(P值均<0.05)。Sham+AngⅡ+I组和OVX+AngⅡ+I组血清肌酐、尿素氮水平和尿MA/Cr值分别较Sham+AngⅡ组与OVX+AngⅡ组显著降低(P值均<0.05)。与Sham组比较,OVX组和OVX+AngⅡ组血清雌二醇(E2)水平均显著降低(P值均<0.05)。与OVX+AngⅡ组比较,OVX+AngⅡ+I组E2水平显著升高(P值均<0.05)。行去势手术的3组促卵泡素(FSH)水平均分别较未行去势手术的3组显著升高(P值均<0.05)。与Sham组比较,Sham+AngⅡ组肾间质纤维化面积、纤维化相关基因表达量均显著增加(P值均<0.05);与Sham+AngⅡ组比较,Sham+AngⅡ+I组肾间质纤维化面积、纤维化相关基因表达量均显著减少(P值均<0.05)。与OVX组比较,OVX+AngⅡ组肾间质纤维化面积、纤维化相关基因表达量均显著增加(P值均<0.05),而OVX+AngⅡ+I组肾间质纤维化面积、纤维化相关基因表达量均显著减少(P值均<0.05)。与DMSO组比较,细胞株AngⅡ组纤维粘连蛋白(Fn)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)α1 mRNA水平均显著升高(P值均<0.01)。与AngⅡ组相比,细胞株AngⅡ+I组Fn和ColⅠα1 mRNA水平均显著降低(P值均<0.01)。结论体内和体外实验均证实淫羊藿苷能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的肾纤维化,对肾脏有保护作用,但其具体机制仍待进一步深入研究。

摘要： 淫羊藿苷 (ICA) 是从淫羊藿属植物茎叶中提取的总黄酮的有效成分.ICA对恶性肿瘤的发生、发展有重要的调节作用, 还可抑制多种恶性肿瘤, 逐渐成为国内外的研究热点.ICA防治恶性肿瘤的作用机制主要包括诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞侵袭转移、抑制肿瘤血管形成、协同增效和减轻放化疗毒副作用等, 通过对国内外有关ICA防治恶性肿瘤作用机制的研究作一综述, 以期将其更好地应用于临床.

摘要： 为了探讨淫羊藿甙对高浓度葡萄糖抑制MC3T3-E1细胞成骨分化是否具有保护左右,采用含10 mmol/L β-磷酸甘油、50 mg/L维生素C以及10-8 mol/L地塞米松的α-MEM培养基诱导MC3T3-E1细胞成骨分化.根据培养基葡糖糖含量不同分别设置对照组(5.5 mol/L葡萄糖)、高糖组(22 mol/L葡萄糖)和药物干预组(22 mol/L葡萄糖).药物干预组各组细胞换液时分别加入0.1 μmol/L、1.0 μmol/L和10 μmol/L的淫羊藿甙.通过茜素红染色、钙含量检测方法检测诱导培养25 d后细胞外钙含量,使用Real time PCR检测诱导培养7d后成骨标志分子表达,观察各组MC3T3-E1细胞的成骨分化情况.使用活性氧检测试剂盒检测诱导培养7d后的各组MC3T3-E1细胞内自由氧(reactive oxygen species,ROS)生成水平.结果表明:22mmol/L葡萄糖组细胞钙含量最低,成骨标志分子ALP、Osteorix及Runx2表达降低,细胞内自由氧生成水平升高,MC3T3-E1细胞成骨分化受到抑制.使用不同浓度淫羊藿甙干预后,细胞钙含量升高,成骨标志分子ALP、Osteorix及Runx2表达升高,细胞内自由氧生成水平降低,MC3T3-E1细胞成骨分化抑制作用呈现浓度依赖性的减弱.可见淫羊藿甙能够通过降低细胞内自由氧水平,减弱高浓度葡萄糖对成骨细胞分化的抑制作用.

摘要： Objective To investigate the effect of icariin (ICA) on the bisphenol A (BPA)enhanced proliferation function of thyroid carcinoma cell B-CPAP and underlying mechanism.Methods The proliferation of Gastric B-CPAP cell line was evaluated by cell counting kit-8 (CCK-8).Apoptosis and ROS expression in B-CPAP cells were detected by flow cytometry.The expression of superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA) in B-CPAP cells were measured by individual assay kits.The expressions of Bcl-2 and γ-HA2X were detected by Western blot.SPSS 18.0 software was used to analyze the data.Results B-CPAP cell activity was promoted by treatment with 3 × 10-7 mol/L BPA for 48 h,with significant difference in absorbance between BPA and control groups (1.089 ±0.053 vs 0.935 ±0.010,P ＜0.05).The cell activities of BPA + ICA25,BPA + ICA50,BPA + ICA100 and BPA + ICA200 groups was 0.780 ±0.036,1.007 ±0.050,0.958 ±0.033 and 0.625 ± 0.064,respectively (all P ＜ 0.01).The proliferation of B-CPAP cells treated with BPA for 72 hours showed a similar trend to 48 hours.There was no significant difference between all treatment groups in 24 hours.The apoptosis rate was (19.272 ± 0.186)％ in BPA-treated cells,and was (22.412 ± 0.238) ％ in control cells (P ＜ 0.05).The apoptosis rates of BPA + ICA50 and BPA + ICA200 groups were (23.688 ± 0.412) ％ and (30.270 ± 0.696) ％,respectively (P ＜ 0.01).The intracellular accumulation of ROS in BPA,BPA + ICA50,and BPA + ICA200 groups were 806 ± 21,1 772 ± 37,2 041 ± 16,respectively (P ＜ 0.01).The expressions of anti-apoptotic protein Bcl-2 in control,BPA,BPA + ICA50,BPA + ICA200 groups were 7 120 ± 151,9 801 ± 286,5 902 ± 171 and 4 203 ±216,respectively (P ＜0.01).Conclusion BPA can promote the proliferation of thyroid carcinoma B-CPAP cells and decrease the apoptosis of cells,and this effect can be inhibited by ICA.The possible mechanism is to induce high expression of intracellular ROS and inhibit the expression of antioxidase system,leading to cell oxidative damage,thereby inducing apoptosis.%目的 分析淫羊藿甙(icariin,ICA)逆转环境内分泌干扰物双酚A(bisphenol A,BPA)促甲状腺癌B-CPAP细胞增殖功能及可能机制.方法 采用CCK-8试剂盒检测不同浓度ICA、BPA处理组B-CPAP细胞增殖变化,流式细胞仪技术检测细胞凋亡率及活性氧(reactive oxygen species,ROS)的表达,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒检测B-CPAP胞内超氧化物歧化酶活性,脂质氧化试剂盒检测胞内丙二醛(malondialdehyd,MDA)表达变化,采用蛋白质印迹法(Westernblot)检测Bcl-2及γ-HA2X蛋白表达.采用SPSS 18.0统计学软件进行统计学分析.结果 3×10-1moL/L BPA处理48 h后,BPA组A值明显高于对照组(1.089±0.053比0.935±0.010,P＜0.05);BPA +ICA25组、BPA+ ICA50组、BPA+ ICA1oo组、BPA+ ICA200组A值分别为0.780 ±0.036、1.007±0.050、0.958±0.033、0.625±0.064,均高于BPA组(P值均＜0.01).72 h各处理组增殖趋势同48 h相似,24h各组差异无统计学意义.48 h后BPA凋亡率为(19.272 ±0.186)％,而对照组为(22.412±0.238)％(P＜0.05);BPA+ ICAso组、BPA+ICA200组B-CPAP细胞凋亡率分别为(23.688 ±0.412)％、(30.270±0.696)％ (P＜ 0.01).BPA +ICA50组、BPA+ ICA2m组ROS均高于BPA组(1 772±37、2 041±16比806±21,P值均＜0.01),呈剂量依赖性.对照组和BPA组的Bcl-2蛋白表达量高于BPA +ICA5o和BPA+ICA200组(7 120±151、9 801 ±286比5 902±171、4 203 ±216,P ＜0.01).结论 BPA可良好地促进甲状腺癌B-CPAP细胞增殖、降低细胞凋亡率,而这种作用可被ICA逆转,其作用可能途径为诱导胞内ROS高表达且抑制抗氧化酶体系表达,导致细胞氧化损伤,从而诱导凋亡.

摘要： 背景与目的：淫羊藿甙(icariin，ICA)，是从檗科淫羊藿属植物中提取的重要黄酮类活性化合物。研究表明，ICA对肺癌和胃癌等肿瘤有很好的抑制作用，有望开发为疗效较好的抗肿瘤药，但其作为有前景抗肿瘤药物在甲状腺癌中的研究较少，其作用机制罕见报道。该研究拟探究不同浓度ICA对甲状腺癌B-CPAP细胞系增殖凋亡、细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)及抗氧化酶系统的影响，探究ICA对甲状腺癌活性影响机制是否具有浓度-时间依赖性。方法：采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度ICA对B-CPAP细胞系增殖的影响，采用流式细胞仪技术检测ICA对细胞凋亡及细胞内ROS的影响，采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)试剂盒检测ICA对细胞内SOD表达影响，采用丙二醛(malondialdehyd，MDA)检测试剂盒检测ICA对细胞内MDA表达的影响，采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Bcl-2及γ-HA2X蛋白的表达。结果：ICA处理48 h后B-CPAP细胞活性降低，细胞凋亡率上升，呈剂量-时效依赖性(P＜0.01)。ICA 50和200 mg/L处理组ROS生成量依次是对照组(Control组)的(2.12±0.14)倍和(2.41±0.12)倍。ICA促进细胞膜脂质化产物MDA的累积，降低抗氧化酶SOD活性，活性比Control组下降(9.35±1.45)%和(21.5±1.52)%。ICA 200 mg/L处理组抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(13.64±1.71)%。结论：ICA具有良好的抑制甲状腺癌B-CPAP细胞活性的作用，并呈现剂量依赖性，其主要作用途径可能是促进细胞内ROS高表达，抑制SOD表达，抗凋亡蛋白Bcl-2低表达，导致细胞不可逆损伤，从而诱导细胞凋亡。%Background and purpose:Icariin (ICA) is the important active flavonoids extracted from Berberidaceaeepimedium. It has been shown to be effective in suppressing cancers including lung cancer and gastric cancer. Thus, it is expected to be developed for cancer treatment. However, there were few studies on icariin as a promising anticancer drug for the treatment of thyroid cancer. The mechanisms underlying anticancer effects of ICA in thyroid cancer are rarely reported. This study was to explore the proliferation and apoptosis, intracellular ROS and antioxidant enzyme systems of the thyroid carcinoma cell line B-CPAP treated with different concentrations of ICA. It aimed to explore the mechanism underlying anticancer effects of ICA, and to determine whether it is concentration- or time-dependent manner.Methods:The proliferation of B-CPAP cell line treated with different concentrations of ICA was detected by cell counting kit-8 (CCK-8). The cell apoptosis and intracellular ROS were observed by flow cytometry. The expression of intracellular superoxide dismutase and intracellular malondialdehyde were measured by SOD detection kit and MDA assay kit, respectively. Bcl-2 and γ-HA2X were detected by Western blot.Results:ICA reduced B-CPAP cell activity, increased the rate of apoptosis in a dose- and time-dependent manner after 48 h (P<0.01). The ROS of ICA 50 mg/L and 200 mg/L groups were (2.12±0.14)-fold and (2.41±0.12)-fold of the control group, respectively. ICA promoted accumulation of malondialdehyde, and reduced antioxidant enzyme SOD activity. The SOD activity was decreased by (9.35±1.45)% (ICA 50 mg/L group) and (21.5±1.52)% (ICA 200 mg/L group) compared with the control group, respectively. The anti-apoptotic protein Bcl-2 in ICA 200 mg/L group was decreased by (13.64±1.71)%compared with the control group.Conclusion:Icariin inhibited activity of thyroid cancer B-CPAP cells in a dose- and time-dependent manner. It plays an important role in promoting intracellular ROS expression, inhibiting superoxide dismutase expression and decreasing Bcl-2, which leads to irreversible damage to the cell, thereby inducing apoptosis.

摘要： 目的:研究淫羊藿甙(icariin,ICA)对MCF--7细胞增殖/凋亡作用的影响及其作用机制.方法:采用MTT比色分析法及Annexin V/PI标记流式细胞仪检测ICA对MCF-7细胞的增殖与凋亡作用的影响,采用Western blot检测蛋白表达,研究ICA是否通过ERK/MAPK信号转导通路起作用.结果:与对照组比较,MCF-7细胞培养24h后,ICA各组OD值均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);培养48h后,各组差异均有统计学意义(P＜0.05);培养72h后,各组差异均有统计学意义(P＜0.05)。与对照组比较,培养24h后,10mMES单独作用后对MCF-7细胞无明显的增殖作用,ES加ICA组有明显的抑制作用.20mM ES诱导结果与10 mM的结果一致.不同浓度的ICA作用48h后,总ERK1/2和MEK蛋白表达均无明显变化,MEK磷酸化水平同样无明显变化,ERK1/2磷酸化水平增高.结论：淫羊藿甙对雌激素阳性人乳腺癌细胞有明显的抑制增殖与诱导凋亡的作用,同时可拮抗雌激素对乳腺癌细胞的增殖作用，但是其作用机制尚不清楚。

摘要： 目的：观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(Cbfa1)蛋白和活性表达的调节，以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程。rn 方法：用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞，进行原代培养,经鉴定后用于实验。设立对照组、淫羊藿甙组（10 ng/ml)以及雌二醇组 (10-s mol/L)，分别用药物干预24 h,抽提核蛋白。利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞Cbfa1与 DNA结合的活性，Western印迹法检测成骨细胞中Cbfa1蛋白的表达。将MAPK信号转导通路抑制剂 U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中，培养24 h，同上法检测Cbfa1活性和 Cbfa1蛋白表达量的变化。rn 结果：淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbfa1蛋白表达量的提高（P<0.05)。加入细胞外信号调节激酶（ERK)途径的抑制剂U0126后，可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbfa1蛋白表达量的上调作用（P<0.05）。加入p38MAPK途径的抑制剂 SB203580后，也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbfa1蛋白表达量的上调作用 (P<0.05).rn 结论：淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbfa1的蛋白表达和结合活性。MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbfa1蛋白表达和活性的上调作用，说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一。

摘要： 采用70％乙醇对箭叶淫羊藿进行了提取,用高效液相色谱对提取液进行了分离,比较了多种流动相对箭叶淫羊藿提取液分离效果的影响,对提取液中淫羊藿甙的峰位进行了确定,采用半制备反相液相色谱对淫羊藿甙进行了制备,通过波谱分析对分离得到的淫羊藿甙进行了确认。比较了不同梯度对淫羊藿提取液分离效果的影响,为箭叶淫羊藿及其制品的质量检测以及箭叶淫羊藿液相色谱指纹图谱的建立奠定了良好的分离分析基础。

摘要： 目的:探讨淫羊藿甙对模型小鼠睾丸病理损伤的影响。rn 方法:应用雷公藤多苷所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察淫羊藿甙对小鼠睾丸病理形态学的影响。rn 结果:模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;淫羊藿甙治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔而可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见到较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好。rn 结论:淫羊藿甙具有防治睾丸病理损伤的作用。

摘要： 目的：淫羊藿是小檗科多年生草本植物，别名仙灵脾，是具补肾壮阳,祛风除湿功效的特色传统中草药。淫羊藿甙是其主要的黄酮类提取物，现代药理实验研究表明，淫羊藿甙能增强心脑血管血流量、提高免疫功能、调节骨代谢、还具有抗衰老和抗肿瘤等功效。在本实验中将着重探讨淫羊藿甙抗肿瘤的功效。以淫羊藿甙对胃癌细胞BGC-823进行处理，在划痕实验和三维细胞迁移实验观察细胞迁移运动能力的改变；并以Western blotting，RT-PCR等方法检测胞内相关蛋白Rac1，VASP表达量的改变；并筛选Rac1，VASP的有效干扰片段，设置Rac1-siRNA组，VASP-siRNA为对照组。rn 方法：rn （1）设计并合成三条Rac1，VASP特异性siRNA，分别为Rac1-99，Rac1-328，Rac1-439；VASP-942，VASP-1002，VASP-1024。rn （2）进行有效片断筛选：同时设置空白对照组，阳性组，FAM阴性对照组，经脂质体介导转染，RT-PCR检测Rac1，VASP的mRNA表达量，Western blotting检测蛋白表达，计算抑制效率，确定有效序列。rn （3）MTT 法筛选淫羊藿甙，VEGF的有效作用浓度。rn （4）设置Rac1小干扰组，VASP小干扰组，VEGF组，淫羊藿甙组及空白对照组；除空白组外，各组都以VEGF进行处理，提高Rac1，VASP表达量；之后分别以Western blotting，RT-PCR进行检测；并以二维划痕实验和三维细胞侵袭实验（Transwell migration assays）观察胃癌细胞迁移和侵袭能力的改变。rn 结果：rn （1）VEGF组相对空白组细胞迁移运动能力明显增强（P＜0.05），相关蛋白表达量增多。rn （2）以Rac1-siRNA，VASP-siRNA 转染胃癌细胞BGC-823 后，被转染细胞中Rac1，VASP的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05），证明 Rac1-siRNA，VASP-siRNA可抑制细胞中相关蛋白的表达。rn （3）淫羊藿甙组内Rac1，VASP 表达量明显下降（P＜0.05）；同时在划痕实验和三维细胞迁移实验中胃癌细胞的迁移运动能力都有所减弱（P＜0.05）。rn 结论：rn （1）VEGF，Rac1，VASP对胃癌细胞的迁移运动能力有着重要的影响。rn （2)VEGF 可提高胞内Rac1，VASP的表达量及细胞运动能力。（rn 3）siRNA组明显抑制胃癌细胞内Rac1，VASP的mRNA合成及其相应蛋白的表达，并且降低其迁移和侵袭能力。rn （4）淫羊藿甙可明显改变胃癌细胞BGC-823的迁移侵袭能力，并影响相关蛋白的表达。

摘要： 目的：探讨淫羊藿甙体外抑制SIV复制作用和抑制SIV感染诱导的CEMx174细胞凋亡的信号转导机制. 方法：细胞病变和间接免疫荧光法测定了淫羊藿甙对SIV复制的抑制作用,Annexin V 和Propidiumiodide (PI) 双染法测定淫羊藿甙对SIV感染导致CEMx174细胞凋亡的作用,放免法测定了SIV感染CEMx174细胞内cAMP含量和依赖cAMP的蛋白激酶活性,Western blotting 法测定了PKA依赖的组蛋白磷酸化的水平. 结果：用不同浓度的淫羊藿甙处理细胞后结果表明,其半数毒性浓度为134ug/ml,半数抑制浓度是26ug/ml,治疗指数为5.15.淫羊藿甙对感染细胞凋亡的抑制要比正常细胞显著为高(P＜0.05).50 μg/ml淫羊藿甙作用病毒感染细胞15min后显著降低正常和感染细胞内的cAMP含量,但对感染细胞的cAMP含量影响更加显著.50 μg/ml 淫羊藿甙可以显著下调感染和正常细胞的PKA活性(P＜0.05).采用Western blotting法测定了PKA依赖的组蛋白磷酸化的水平.病毒感染可以使磷酸化的组蛋白-H3升高,50 μg/ml 淫羊藿甙作用2h后,可以显著降低磷酸化组蛋白-H3的水平. 结论：SIVmac251 感染导致的细胞凋亡是cAMP-PKA 信号转导通路激活的结果,而短时间淫羊藿甙处理SIVmac251感染的CEM x174细胞可以暂时减缓SIVmac251诱导的细胞凋亡过程.

摘要： 目的:探讨淫羊藿甙体外抑制SIV复制作用和抑制SIV感染诱导的CEMx174细胞凋亡的信号转导机制.方法:细胞病变和间接免疫荧光法测定了淫羊藿甙对SIV复制的抑制作用,Annexin V和Propidiumiodide(PI)双染法测定淫羊藿甙对SIV感染导致CEMx174细胞凋亡的作用,放免法测定了SIV感染CEMx174细胞内cAMP含量和依赖cAMP的蛋白激酶活性,Western blotting法测定了PKA依赖的组蛋白磷酸化的水平.结果:用不同浓度的淫羊藿甙处理细胞后结果表明,其半数毒性浓度为134ug/ml,半数抑制浓度是26ug/ml,治疗指数为5.15.淫羊藿甙对感染细胞凋亡的抑制要比正常细胞显著为高(P＜0.05).50μg/ml淫羊藿甙作用病毒感染细胞15min后显著降低正常和感染细胞内的cAMP含量,但对感染细胞的cAMP含量影响更加显著.50μg/ml淫羊藿甙可以显著下调感染和正常细胞的PKA活性(P＜0.05).采用Western blotting法测定了PKA依赖的组蛋白磷酸化的水平.病毒感染可以使磷酸化的组蛋白-H3升高,50μg/ml淫羊藿甙作用2h后,可以显著降低磷酸化组蛋白-H3的水平.结论:SIVmac251感染导致的细胞凋亡是cAMP-PKA信号转导通路激活的结果,而短时间淫羊藿甙处理SIVmac251感染的CEM x174细胞可以暂时减缓SIVmac251诱导的细胞凋亡过程.

摘要： 目的：检测淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中Smad4的mRNA影响。方法：用0ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml、40 ng/ml的淫羊藿甙刺激MC3T3-E1细胞。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况。通过四甲基噻唑蓝(MTT)法测绘细胞生长曲线和计算细胞群体倍增时间：描述刺激MC3T3-E1细胞的增殖能力。用速率分光光度法测定ALP的含量；免疫组织化学法观察I型胶原的产生，用以判断细胞的分化情况。用RT-PCR测定Smad4的mRNA数量。结果：10 ng/ml、20 ng/ml浓度淫羊藿甙可使MC3T3-E1细胞的生长曲线明显上移、群体倍增时间缩短(P＜0.01)；并可使MC3T3-E1细胞产生ALP和Ⅰ型胶原量增加，刺激ALP作用呈现时间和剂量的依赖性(P＜0.01)；RT-PCR显示：10 ng/ml、20 ng/ml浓度淫羊藿甙可以刺激MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的数量增加。上述作用以10 ng/ml浓度最强(P＜0.01)。结论：淫羊藿甙刺激成骨细胞MC3T3-E1增殖与分化；上述作用可能通过提高MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的量而产生。

摘要： 目的：淫羊藿（ICA）是小檗科多年生草本植物，别名仙灵脾，是具补肾壮阳，祛风除湿功效的特色传统中草药。本实验中着重观察ICA对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响，研究在这一过程中ICA对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP) 表达水平以及Rac1活性的影响，并进一步探讨Rac1活性与VASP表达之间的关系。rn 方法：体外培养乳腺癌细胞系MCF-7：rn （1) 培养基中加入不同浓度ICA（0，10，25，50，100μg/ml) 或多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作为阳性对照，24 h后用细胞侵袭实验和损伤修复实验分别观察不同处理组中MCF-7细胞的侵袭和迁移能力的差别；rn （2) 培养基中加(或不加)入ICA（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，Western blotting和RT-PCR分别检测各组细胞中 Rac1和VASP在蛋白和mRNA两个表达水平的差异，并用GST pull-down试验检测各组细胞Rac1活性的差异。rn （3）将Rac1-siRNA片段经脂质体转染至MCF-7 细胞内，24小时后，Western blotting和RT-PCR分别检测细胞Rac1和VASP表达水平的变化。rn 结果：rn （1) ICA对MCF-7 细胞的侵袭迁移能力均有明显的抑制作用，并且随浓度增加抑制作用逐渐增强，浓度为50μg/ml的ICA对细胞侵袭转移的抑制作用与阳性对照多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作用相当（P）0.05）；rn （2) EGF（15 ng/ml) 单独处理15 min后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显升高（P＜0.05），ICA（50μg/ml) 单独处理24 h后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显降低（P＜0.05），ICA（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，细胞内Rac1活性和VASP表达量与空白组无明显差异（P）0.05）。rn （3）Rac1-siRNA转染组细胞中Rac1，VASP的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。rn 结论：ICA 可以有效抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力，这种抑制作用是通过降低细胞内Rac1的活性，进而减少VASP表达而实现的。

摘要： 糖皮质激素广泛应用于如关节炎、哮喘、系统性红斑性狼疮等自身免疫性疾病,血液及其他系统肿瘤的联合治疗,以及器官移植术后的免疫抑制治疗.长期应用严重的副作用之一是快速骨丢失、股骨头坏死、严重骨质疏松和骨折的危险性增加;尽管如此,由于治疗的需要,试图通过减少使用糖皮质激素来避免骨坏死并不成功,许多患者数月、数年、甚至终生接受糖皮质激素治疗,因此研究糖皮质激素诱导骨质疏松的机制并寻找有效措施进行干预具有重要的意义.

摘要： 本发明涉及一种脱水淫羊藿糖苷化合成淫羊藿单甙的方法。现有脱水淫羊藿素糖苷化合成淫羊藿单甙方法选择性差。为此，本发明采用碳酸锶作催化剂，先将脱水淫羊藿素溶于有机溶剂中，在碳酸锶催化下，与α-溴代四乙酰基-D-吡喃葡萄糖反应，进行3位接糖，然后在三氟甲磺酸银催化，与α-溴代三乙酰基-L-吡喃鼠李糖反应，进行7位接糖，然后经脱乙酰基保护反应，得到淫羊藿单甙。本发明适于合成淫羊藿单甙。

摘要： 本发明涉及一种脱水淫羊藿糖苷化合成淫羊藿单甙的方法。现有脱水淫羊藿素糖苷化合成淫羊藿单甙方法选择性差。为此，本发明采用碳酸锶作催化剂，先将脱水淫羊藿素溶于有机溶剂中，在碳酸锶催化下，与α-溴代四乙酰基-D-吡喃葡萄糖反应，进行3位接糖，然后在三氟甲磺酸银催化，与α-溴代三乙酰基-L-吡喃鼠李糖反应，进行7位接糖，然后经脱乙酰基保护反应，得到淫羊藿单甙。本发明适于合成淫羊藿单甙。

摘要： 本发明提供一种酶法水解淫羊藿甙糖基制备低糖淫羊藿甙或甙元的方法，包括如下步骤：以淫羊藿为细菌、霉菌、酵母菌的发酵产酶诱导物，液态发酵或固态发酵后得到含酶混合液，在含酶混合液内加入硫酸铵或者乙醇提取酶；将所提取的酶、淫羊藿甙及醋酸或磷酸混合反应1-36小时，反应条件为温度4-75°C、PH值3-9；提取低糖淫羊藿甙或甙元。克服了现有技术所存在的对甙破坏性大，污染大，目的性差等缺点，具有无污染、目的性强、转化率高的优点。

摘要： 本发明涉及一种从淫羊藿属植物中提取淫羊藿甙的方法。该方法的技术关键在于在常压条件下利用层析技术，将淫羊藿属植物中浸提的淫羊藿甙粗品进行分离和提纯，最后进行重结晶获得淫羊藿甙纯品。本发明提供的方法可以高效分离提纯淫羊藿甙，从而获得高纯度和高回收率的淫羊藿甙纯品；使用低毒的有机溶剂，避免了产品中有毒有害的有机溶剂残留；并且其生产工艺简捷可行，耗时较短，且所用资源可再生利用，大大降低了生产成本。

摘要： 本发明公开了一种以淫羊藿甙为原料先后制备淫羊藿次甙Ⅱ和淫羊藿素的方法。本发明用低含量的淫羊藿甙原料以一种酶催化的方法通过简单的生产工艺流程最终可以得到两种高纯度的淫羊藿甙的增效改进产物，分别为是淫羊藿次甙Ⅱ和淫羊藿素。本发明针对淫羊藿甙通过普通酸水解生产淫羊藿素转化率低且污染严重的问题，创造性地使用了酶催化水解和酸水解相结合的方式，对传统淫羊藿素的生产工艺进行了巨大的提升和优化，转化率提高到99％以上。本发明的生产操作简单，设备要求低，生产过程中的溶剂可以循环利用，绿色环保，可大规模进行生产。

摘要： 本发明提供一种酶法水解淫羊藿甙糖基制备低糖淫羊藿甙或甙元的方法，是用酶水解淫羊藿甙糖基，制备低糖淫羊藿甙或甙元。包括如下步骤：取能水解淫羊藿甙糖基的酶；将酶、淫羊藿甙及缓冲液混合反应1－36小时，反应条件为温度4－75°C、pH值3－9；提取低糖淫羊藿甙或甙元。克服了现有技术所存在的对甙破坏性大，污染大，目的性差等缺点，具有无污染、目的性强、转化率高的优点。尤其是在微生物发酵中加入了产酶诱导物，可大大提高其产酶量，有助于充分水解淫羊藿甙糖基，更加提高了低糖淫羊藿甙或甙元的转化率。

摘要： 本发明涉及淫羊藿药材提取淫羊藿甙的方法，其包括粉碎、两次提取、浓缩、萃取、溶解、反应、层析、清洗、洗脱、和浓缩干燥等步骤。该方法可提高淫羊藿甙的提取效率，解决原料紧张问题，并可延长树脂的使用寿命、降低环境污染、提高淫羊藿甙的含量及得率、减轻生产企业的生产压力。

摘要： 本发明公开了一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，属于生物医药技术领域，包括以下步骤：1)将淫羊藿用乙醇分别提取两次；2)合并滤液，浓缩得到浸膏；3)加乙醇脱除淫羊藿多糖，用乙酸乙酯分6次萃取；4)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩、过滤、烘干即得到淫羊藿甙。本发明的提取方法，工艺精简，原料淫羊藿来源广泛，成本低廉，提取制备过程环境友好，本发明为开发新型的淫羊藿甙保健品和药品开辟了广阔的市场。

摘要： 本发明涉及一种从淫羊藿属植物中制备含量大于98％的淫羊藿甙的方法。它是将淫羊藿叶子粉碎过目，从淫羊藿中提取淫羊藿甙，利用极性或者弱极性的大孔树脂进行初分离，利用溶剂处理法对粗分离淫羊藿甙进行纯化，利用溶剂处理法对初结晶物进行重结晶处理；该发明的技术优势在于：a)联合使用大孔树脂和有机溶剂纯化法相结合，使产品的回收率和纯度都有明显的提高。b)简化生产工艺，缩短生产周期，使生产成本有所降低。c)使用了无毒无害的有机溶剂，大大降低了产品中有毒有害溶剂的残留量，提高了产品的品质。

摘要： 本发明涉及一种从淫羊藿属植物中提取淫羊藿甙的方法。该方法的技术关键在于在常压条件下利用层析技术，将淫羊藿属植物中浸提的淫羊藿甙粗品进行分离和提纯，最后进行重结晶获得淫羊藿甙纯品。本发明提供的方法可以高效分离提纯淫羊藿甙，从而获得高纯度和高回收率的淫羊藿甙纯品；使用低毒的有机溶剂，避免了产品中有毒有害的有机溶剂残留；并且其生产工艺简捷可行，耗时较短，且所用资源可再生利用，大大降低了生产成本。