人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法的建立

摘要

目的建立和优化人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法.方法对第一向双向电泳的关键因素与环节(如样品处理、电泳参数和凝胶浓度等)进行一系列优化.进一步采用双向凝胶电泳分离骨肉瘤组和正常组总蛋白质,银染显色,Image Master图像分析系统分析电泳图谱.结果重复性实验结果显示同组样品在3次不同实验中所的蛋白质斑点数目相对标准差.(变异系数平均值%):骨肉瘤组和正常组分别为23.00±10.11、20.33±9.90.(变异系数范围%):骨肉瘤组和正常组分别为3.80-6.89、2.70-6.89.同一蛋白质斑点在3次实验中等电点、分子量的相对标准差分别为8.93%±1.17%,10.16%±2.02%和10.87%±3.86%.获得了优于传统实验方法的分辨率和可重复性的双向凝胶电泳图谱.结论优化的双向凝胶电泳图象分析技术适合于骨肉瘤蛋白质组研究.