抗人成骨肉瘤单克隆抗体-人血清白蛋白甲氨蝶呤偶联物的抗肿瘤作用

摘要

目的应用化学交联法制备抗人成骨肉瘤单克隆抗体(OSMcAb)-人血清白蛋白(HSA)-甲氨蝶呤(MTX)偶联物并进行体外细胞毒性实验.方法采用碳二亚胺、活化酯及SPDP法制备OSMcAb-HSA-MTX间接偶联物;同时应用活化酯法制备出OSMcAb-MTX;并进行体外靶细胞结合实验、细胞毒性实验和集落形成抑制实验.结果化学交联法制备出的偶联物的性质及药物含量稳定.抗体蛋白活性保存良好.集落形成抑制实验中,OSMcAb-HSA-MTX、OSMcAb-MTX的IC50(μg/L)分别为2.550±0.114、2.710±0.145,它们杀伤作用均明显大于游离MTX(IC50为5.510±1.529)(P<0.05).24h细胞毒性实验中,OSMcAb-HSA-MTX、OSMcAb-MTX的对MG-63细胞、T24细胞的IC50(μg/L)分别为66.5:3785和79.8:3025,偶联物杀伤作用在靶细胞明显强于非靶细胞(P<0.01).结论以化学交联法制备OSMcAb-HSA-MTX偶联物方法可行;偶联物OSMcAb-HSA-MTX在体外具有良好的抗肿瘤作用.