脂质体介导转染神经干细胞行糖尿病大鼠视网膜下移植的研究

摘要

目的 观察大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)阳离子脂质体法转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的效果;研究阳离子脂质体Lipofectamine介导转染对大鼠胚胎NSCs糖尿病大鼠视网膜下移植的影响.方法 将报告基因pEGFP-N1经Lipofectamine介导转染NSCs(EGFP组),观察EGFP的表达;以同期培养未转染的细胞作为对照组,测定细胞活力、生长曲线和转染效率.将两组NSCs分别行糖尿病大鼠视网膜下移植,RT-PCR、Western blot分别检测TOLL受体4(TLR4)、NF-kB的mRNA及蛋白质表达.结果 被转染的体外培养大鼠胚胎NSCs长期表达EGFP,两组细胞具有相似的形态学变化和生长曲线,流式细胞仪结果显示转染率最高可达35.2%.行视网膜下移植后,TLR4、NF-kB mRNA及蛋白质的表达差异无统计学意义.结论 阳离子脂质体Lipofectamine介导转染NSCs效率较高,报告基因表达时间长,不影响糖尿病大鼠NSCs视网膜下移植.