健脾祛瘀法对血脂异常却DE基因缺失小鼠视网膜和Bruch膜的影响

摘要

背景血脂异常是年龄相关性黄斑变性（AMD）的发病因素之一，AMD的治疗方法一直是研究的热点。目的观察健脾祛瘀中药制剂对血脂异常ApoE基因缺失（ApoE-／-）小鼠视网膜和Bruch膜的治疗作用。方法采用随机数字表法根据小鼠体质量分层随机分组。将36只2月龄ApoE-／-小鼠分为普通饮食组、高脂模型组及健脾祛瘀治疗组，每组12只。高脂模型组及健脾祛瘀治疗组小鼠均用高脂饲料喂养4个月，健脾祛瘀治疗组小鼠于6月龄开始给予健脾祛瘀制剂灌胃，每次0．3ml，每Et2次，持续1个月；普通饮食组和高脂模型组小鼠同时间点开始用等量生理盐水灌胃，从6月龄开始3个组均给予普通饲料喂养。于小鼠7月龄时抽取股静脉血检测各组小鼠血浆总胆固醇（Tc）、低密度脂蛋白（LDL）和血浆甘油三脂（TG）浓度，抽血后以过量麻醉法处死，制备视网膜组织切片并行Masson染色，光学显微镜和透射电子显微镜下观察视网膜和Bruch膜的组织形态学改变。采用Mias2000型图像分析系统半定量检测各组小鼠视网膜外核层细胞、视网膜色素上皮（RPE）层细胞数及Bruch膜厚度。结果7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠TC、LDL和TG浓度分别为（6．47±0．49）、（1．46±0．10）、（0．62±0．21）mmol／L，比同龄高脂模型组小鼠的（10．53±0．30）、（1．90±0．13）mmol／L和（1．15±0．29）mmol／L以及普通饮食组小鼠的（9．63±0．18）mmol／L、（1．12±0．15）、（0．88±0．21）mmol／L均明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05～0．01）。7月龄高脂模型组小鼠及同龄普通饮食组小鼠外核层和RPE层细胞排列紊乱，细胞萎缩明显，Bruch膜纤维分叉，高脂模型组部分小鼠可见玻璃膜疣；而同龄健脾祛瘀治疗组小鼠外核层和RPE层细胞排列较整齐，细胞萎缩减轻，Bruch膜纤维未见分叉，未见玻璃膜疣。7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠外核层和RPE层细胞数分别为（23124．00±755．18）个及（10．75±0．59）个，比同龄高脂模型组小鼠的（19107．00±1436．82）个和（8．55±1．11）个以及普通饮食组的（21663．00±1073．27）个和（9．75±0．58）个明显增多，差异均有统计学意义（P〈0．05）。7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠Bruch膜厚度为（0．89±0．05）μm，明显比高脂模型组小鼠的（1．02±0．13）μm薄，差异有统计学意义（P〈0．01）。7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠RPE、Bruch膜组织的超微结构形态明显改善。结论健脾祛瘀中药制剂可降低血脂异常ApoE-／-小鼠的高脂血症，改善视网膜外核层、RPE层、Bruch膜的组织结构形态。