核酸薄膜导流杂交技术快速检测结核分支杆菌rpoB基因片段及突变

摘要

目的 探讨用低密度核苷酸薄膜导流杂交技术快速检测结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的可行性.方法 根据MTB rpoB基因设计12个野生型及常见突变型寡核苷酸特异探针,制作低密度核苷酸薄膜微阵列,通过导流杂交技术与薄膜杂交鉴定,并与DNA测序法对比.结果 81株MTB的耐药性试验及DNA测序结果显示,27株耐利福平MTB株中20株(74.1％)存在突变.以DNA测序结果为标准,31株标本(20株耐利福平MTB突变株,11株利福平敏感MTB野生株)低密度核苷酸薄膜导流杂交的敏感性为85％ (17/20),特异性为100％(11/11),阳性预测值为100％(17/17),阴性预测值为78.6％(11/14)；与DNA测序法的符合率为90.3％(28/31).结论 用低密度核苷酸薄膜导流杂交能快速、简便检测MTB,并可提示其是否对利福平耐药,指导临床合理用药.